15-deoxy-△~(12,14)-prostaglandin-J_2通过抑制NF-kB和AP-1激活通路诱导ECV304内皮细胞凋亡

一、15-deoxy-△~(12,14)-prostaglandin-J_2 induces apoptosis in ECV304 endothelial cells by inhibiting NF-kB and AP-1 activation pathways（论文文献综述）

聂蕙斌^[1]（2016）在《硝基油酸对缺血再灌注肾损伤细胞模型的保护作用及相关机制》文中进行了进一步梳理研究背景与研究目的急性肾损伤（AKI）是一组具有高致死率和高花费的临床常见病；其中,肾脏低灌注为AKI的主要发病因素。缺血再灌注（I/R）肾损伤常出现于肾脏移植、肾脏相关手术、肾脏疾病及创伤后,极易发展为慢性肾功能不全,并与一系列严重的肾外损伤相关。尽管有关肾脏I/R损伤的研究很多,目前针对缺血再灌注造成的急性肾损伤尚无有效治疗方式。一系列病理过程参与肾脏I/R损伤的发生,其中氧化应激是再灌注损伤中的始动因素。缺血再灌注损伤时,大量活性氧簇（ROS）生成,引起细胞内抗氧化物活性减低,DNA、脂质及蛋白质的结构和功能遭到破坏；并且有证据表明在猪肾脏I/R损伤模型中,8-oxodG （DNA氧化损伤标志物）表达上调。还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）氧化酶是再灌注过程中ROS的主要来源,它由与细胞内膜结构结合的NOX异构体,p22phox亚基和存在于细胞质基质中的p47phox, p67phox, p40phox和Rac亚基组成。NOX4是肾脏中NADPH氧化酶表达量最丰富的类型,NOX2在肾脏也有表达。NOX4 和 NOX2的表达在猪肾脏I/R损伤中均明显上调。因此,恢复细胞内抗氧化防御系统活性及抑制NADPH氧化酶的激活有助于减轻氧化应激损伤程度。尽管肾小管上皮细胞坏死一直被认为是缺血性AKI的标志性改变,但是在人肾组织活检中,坏死细胞数量无法准确预测肾功能的恶化情况,并且越来越多研究表明,凋亡为缺血性AKI中另一种重要的细胞死亡形式,它能更好的预测肾功能的进展情况。在肾脏细胞中,I／R损伤激活Bax,促进其线粒体转位,增加线粒体外膜通透性,下调Bcl2表达,促进细胞凋亡。此外,近年来研究表明,过氧化物酶体增殖物激活受体γ （PPARγ）活化被认为是I／R损伤的重要治疗靶点,其激动剂可减少I／R损伤后组织中细胞凋亡水平,改善损伤组织功能。硝基脂肪酸是活性一氧化氮（.NO）及亚硝酸根离子（NO2）与不饱和脂肪酸发生氧化还原反应合成的衍生物,包括硝基油酸（OA-NO2）和硝基亚油酸（LNO2）。它们可与蛋白中的亲核氨基酸发生可逆的Micha el加成反应,介导-系列广泛的信号调节、血管保护、过氧化物酶体增殖物激活受体γ （PPARγ）活化、抗炎症反应及抗氧化应激作用。有研究表明,在心脏缺血再灌注损伤中,硝基脂肪酸可缩小心肌梗死范围,提高心肌细胞存活率；在肾脏缺血再灌注损伤中,硝基油酸可改善肾功能,下调肾组织中炎症反应及氧化应激水平。然而其肾脏保护的具体机制尚不明确。根据上述背景,本研究拟建立肾小管上皮细胞缺糖缺氧/复糖复氧（OGD/R）模型来模拟肾脏缺血再灌注损伤,观察硝基油酸对OGD/R引起的细胞凋亡及氧化应激损伤的作用；并进一步探讨其抗凋亡、抗氧化的作用机制。研究方法1.为明确硝基油酸对缺糖缺氧/复糖复氧（OGD/R）处理后肾小管上皮细胞凋亡的作用及机制,选取人肾小管上皮细胞系（HK-2）,给予缺糖缺氧16小时后复糖复氧处理,以建立肾脏缺血再灌注损伤细胞模型。于复糖复氧后不同时间点采用CCK-8法检测细胞存活率；Annexin V/7-AAD双标法检测细胞凋亡水平,western blotting检测凋亡相关蛋白caspase3、cleaved caspase3、cleaved PARP表达变化。选取上述各指标变化最明显的时间点分别给予硝基油酸（OA-NO2,1.25μM）或油酸（OA,1.25 μM）处理,对照组给予与给药组相同体积的乙醇作用。然后采用CCK-8法、Annexin V/7-AAD双标法、Hoechst 33342染色法检测药物对细胞存活及凋亡的影响；Western blotting检测药物对凋亡相关蛋白c aspase3、 cleaved caspase3、cleaved PARP;线粒体组分和细胞质基质组分中Bax、Bcl2、细胞色素C（cyto C）、凋亡诱导因子 （AIF）； 以及存活信号通路蛋白phospho-Akt、Akt、phospho-Gsk 3β、Gsk3β蛋白表达水平的影响。免疫荧光染色检测药物对活化Bax表达变化的影响。最后,采用GW9662口siRNA干扰技术抑制PPARγ活性,观察上述指标的变化情况。2.为明确硝基油酸对缺糖缺氧／复糖复氧（OGD/R）处理后肾小管上皮细胞中氧化应激损伤的作用及机制,选取人肾小管上皮细胞系（HK-2）,给予缺糖缺氧16小时后复糖复氧处理。于复糖复氧后不同时间点,采用DCFH-DA染色检测细胞内氧化应激水平,选取氧化应激水平最高的时间点分别给予硝基油酸（OA-N02,1.25μM）或油酸（O A,1.25μM）处理,对照组给予与给药组相同体积的乙醇作用。然后采用DCFH-DA染色及DHE染色检测药物对损伤后细胞内氧化应激水平的影响；JC-1染色检测药物对损伤后线粒体膜电位变化的影响；实时荧光定量RT-PCR及western blotting分别检测药物对损伤后抗氧化相关蛋白Nrf2、HO-1、GCLM.SOD1以及NADPH氧化酶亚基NOX4、NOX2、p22phox基因及蛋白水平表达变化的影响；ABTS法检测细胞总抗氧化能力变化；还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）氧化法检测细胞内NADPH氧化酶活性变化。最后,采用siRNA干扰技术下调Nrf2基因及蛋白表达,观察上述指标变化。研究结果1.硝基油酸通过调控PPAR γ/Akt/Gsk-3β信号通路改善缺糖缺氧/复糖复氧（OGD/R）诱导的肾小管上皮细胞凋亡1.1缺糖缺氧/复糖复氧（OGD/R）损伤可逐步降低HK-2细胞存活率,增加细胞凋亡CCK-8结果显示,缺糖缺氧8、16、24小时,复糖复氧24小时处理后,细胞存活率分别为80.27±0.96%、51.62±1.37%和29.00±2.69%、Annexin V/7-AAD双标法及western blotting检测凋亡相关蛋白结果显示在缺糖缺氧16小时,复糖复氧3小时（H16R3）处理后,细胞凋亡率和凋亡相关蛋白表达水平最高（均P<0.01）,因此本实验选取H16R3作为OGD/R模型条件。1.2硝基油酸而不是油酸提高缺糖缺氧/复糖复氧（OGD/R）损伤后细胞存活率CCK-8结果显示,硝基油酸（2.5或51μM）作用20小时后, 与乙醇对照组相比,细胞增殖明显被抑制（均P<0.01）；而硝基油酸（0.5,0.75,1.25μM）对细胞增殖无明显作用。与OGD/R组相比,硝基油酸（1.25 μM）预作用可将细胞存活率由48.88±3.13%提升至61.17±4.90%（P<0.05）,而油酸并无此作用。1.3硝基油酸缓解缺糖缺氧／复糖复氧（OGD/R）造成的细胞凋亡Annexin V/7-AAD双标、Hoechst 33342染色及western blotting结果显示：与OGD/R组相比,硝基油酸（1.25μM）预作用组细胞凋亡水平降低（P<0.001）；细胞核形态得到改善；cleaved caspase 3 和 cleaved PARP表达下调（均P<0.05）。1.4硝基油酸抑制缺糖缺氧/复糖复氧（OGD/R）引起的Bax活化、线粒体转位及继发线粒体外膜通透性增加Western blotting分析线粒体/细胞质基质蛋白组分结果显示,与正常对照组相比,OGD/R组中线粒体组分Bax水平升高,细胞色素c和AIF水平下降,差异具有统计学意义（均P<0.05）；而细胞质基质组分Bax水平明显下降,细胞色素c和AIF水平明显升高,差异具有统计学意义（均P<0.01）。与OGD/R组相比,硝基油酸（1.25 μM）预作用组中线粒体组分Bax和细胞质基质组分细胞色素c和AIF水平均明显下降（均P<0.05）。免疫荧光结果显示,与正常对照组相比,OGD/R组细胞中活化Bax水平明显升高；而硝基油酸（1.25 μM）预作用组细胞中活化Bax水平较OGD/R组明显降低（均P<0.001）。1.5硝基油酸恢复缺糖缺氧/复糖复氧（OGD/R）后Akt及Gsk 3β的磷酸化水平Western blotting结果显示,与正常对照组相比,OGD/R组中Akt及Gsk 3β磷酸化水平明显降低,差异具有统计学意义（均P<0.05）；而硝基油酸（1.25 μM）预作用组中Akt及Gsk 3β磷酸化水平恢复至接近正常水平。1.6 GW9662和PPARγsiRNA废除硝基油酸对缺糖缺氧/复糖复氧（OGD/R）后HK-2细胞的保护作用Western blotting结果显示,与阴性对照si RNA转染组相比,PPAR y siRNA转染组中PPARγ蛋白表达水平明显下调（P<0.01）; CCK-8及Annexin V/7-AAD双标结果显示：与阴性对照siRNA转染组相比,PPAR γ siRNA转染组HK-2细胞增殖被抑制（P<0.01）,但细胞凋亡率不增加；而GW9662作用组中细胞增殖及凋亡均无明显变化。在GW9662 （0.5 μM）预作用1小时或PPAR γ siRNA转染后,H16R3+肖基油酸组中细胞存活率和Akt及Gsk 3β磷酸化水平降低至H16R3组水平；细胞凋亡率和凋亡相关蛋白表达水平增加至H16R3组水平。1.7 GW9662和PPAR γ siRNA废除硝基油酸对缺糖缺氧/复糖复氧（OGD/R）引起Bax活化的抑制作用免疫荧光结果显示：在GW9662 (0.5预作用1小时或PPARγ染后,与H16R3组相比,H16R3+硝基油酸组中活化Bax的红色荧光强度仍处于较高水平。2 硝基油酸通过上调抗氧化物表达和抑制NADPH氧化酶活性改善缺糖缺氧/复糖复氧（OGD/R）引起的肾小管上皮细胞氧化损伤2.1 硝基油酸而不是油酸减轻缺糖缺氧/复糖复氧（OGD/R）后细胞内氧化应激损伤DCFH-DA染色结果显示,在缺糖缺氧16小时,复糖复氧4小时（H16R4）处理后,细胞内ROS水平最高（均P<0.01）。因此本实验选取缺糖缺氧16小时（H16R0）作为OGD模型条件；缺糖缺氧16小时,复糖复氧4小时（H16R4）作为OGD/R模型条件。DCFH-DA染色、DHE染色及JC-1染色结果表明,与OGD/R组相比,相应硝基油酸（1.25 μM）预作用组细胞中氧化应激水平明显下降（P<0.01）,线粒体膜电位下降明显改善,而油酸预作用组中,上述指标无明显变化。2.2硝基油酸上调抗氧化物表达实时荧光定量RT-PCR和western blotting检测结果显示,与OGD组及OGD/R组相比,相应硝基油酸（1.25 μM）预作用组中HO-1、GCLM、SOD1基因及蛋白表达水平明显上调（均P<0.05）。ABTS法检测细胞总抗氧化能力结果显示,与正常对照组相比,OGD组和OGD/R组细胞内总抗氧化能力降低（均P<0.01）。而与正常对照组、OGD组和OGD/R组相比,相应硝基油酸（1.25 μM）预作用组细胞内总抗氧化能力明显升高（均P<0.05）。2.3硝基油酸上调Nrf2表达并促进其核转位实时荧光定量RT-PCR结果显示,正常氧浓度培养条件下的硝基油酸（1.25μM）作用组中Nrf2基因表达水平为乙醇对照组中的1.44+0.04倍（P<0.001）。Western blotting结果显示,与正常对照组和OGD/R组相比,相应硝基油酸（1.25μM）预作用组中Nrf2在细胞总蛋白中的表达量分别上调了5.89倍和0.97倍（均P<0.01）；在核蛋白中的表达量分别上调了2.88倍和1.18倍（均P<0.05）。2.4 Nrf2 siRNA部分废除硝基油酸介导的抗氧化物表达上调及抗氧化作用实时荧光定量RT-PCR和western blotting结果显示,与阴性对照siRNA转染组相比,Nrf2 siRNA转染组中,Nrf2基因及蛋白表达水平明显下调（均P<0.001）；在Nrf2 siRNA转染后, H16R4+硝基油酸组与H16R4组相比,HO-1及GCLM基因和蛋白表达水平无明显上调,但SOD1基因和蛋白表达水平仍被上调（P<0.05）。DCFH-DA染色、ABTS法检测细胞总抗氧化能力及JC-1染色结果表明,在Nrf2 siRNA转染后,H16R4+硝基油酸组与H16R4组相比,氧化应激水平无明显下降,总抗氧化能力无明显提高,线粒体膜电位下降无明显改善。2.5硝基油酸抑制缺糖缺氧/复糖复氧（OGD/R）诱导的NADPH氧化酶活化还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）氧化法检测细胞内NADPH氧化酶活性结果显示,与正常对照组相比,OGD组和OGD/R组中NADPH氧化酶活性明显升高（均P<0.05）；与OGD组和OGD/R组相比,相应硝基油酸（1.25μM）预作用组中NADPH氧化酶活性下降（均P<0.05）。实时荧光定量RT-PCR和western blotting结果显示,与OGD/R组相比,相应硝基油酸（1.25 μM）预作用组中NOX4、NOX2、p22phox基因及蛋白表达水平下调（均P<0.05）。2.6 Nrf2 siRNA未影响硝基油酸介导的NADPH氧化酶上调抑制作用实时荧光定量RT-PCR结果显示,与H16R4组相比,阴性对照siRNA和Nrf2 siRNA转染后的H16R4+肖基油酸组中NOX4、NOX2、p22phox基因表达水平仍被下调（均P<0.05）。研究结论1.硝基油酸下调缺糖缺氧/复糖复氧后HK-2细胞凋亡水平；2.硝基油酸减轻缺糖缺氧/复糖复氧后HK-2细胞内氧化应激损伤；3.硝基油酸可通过PPARγ依赖的方式激活Akt/Gsk3β通路,抑制Bax活化及其线粒体转位,从而减少缺糖缺氧/复糖复氧造成的线粒体源性细胞凋亡。4.硝基油酸可上调SOD1和Nrf2依赖的HO-1＝GCLM表达水平,恢复抗氧化系统功能；抑制NADPH氧化酶激活,减少ROS生成,从而改善缺糖缺氧/复糖复氧造成的氧化应激损伤。

李秀英^[2]（2009）在《Nrf2在慢性阻塞性肺疾病中的作用及其与IKKα/β的关系》文中进行了进一步梳理第一部分动物部分Nrf2在慢性阻塞性肺疾病大鼠模型中的作用及与IKKα/β的关系目的探讨核因子Nrf2在慢性阻塞性肺疾病发病中的作用及与NF-KB和IKKα/β之间的关系。方法36只Wistar大鼠随机分为A,B,C三个组,各12只,A组为对照组,B组为慢性阻塞性肺疾病模型组,C组为15d-PGJ2干预组,采用熏烟+气管内滴注脂多糖的方法建立模型;C组在建立模型的基础上第1天和第14天静脉注射15d-PGJ2（0.3 mg/kg）干预。各组分别进行一般情况的观察,30天后检测大鼠肺功能,经微机处理计算出FEV0.3/FVC、R1及Cdyn。测定肺功能后,进行肺泡灌洗左肺,取其上清液,检测总抗氧化能力和SOD的检测。取左肺组织固定、病理切片,部分HE染色光镜观察病理改变结果,部分切片免疫组化和右肺抽提mRNA,RT-PCR法检测Nrf2,NF-KB p65和IKKα/β的表达。所有结果应用SPSS12.0软件系统进行统计分析。结果（1）慢性阻塞性肺疾病的大鼠模型成功,模型组大鼠FEV0.3/FVC（%）和Cdyn（动态肺顺应性）明显低于正常对照组,差异有显着性（均P＜0.05）,R1（气道阻力）明显高于正常对照组,差异有显着性（均P＜0.05）,干预组介于了两组之间,气流受限和肺通气功能较模型组有明显改善,差异有统计学意义（P＜0.05）。（2）大鼠肺组织肺泡灌洗液氧化能力的检测示:模型组的SOD和T-AOC的水平均明显低于对照组,干预组介入两者之间,差异均有统计学意义。（3）大鼠肺及支气管组织的病理学观察模型组病理切片示模型组的肺组织破坏、增殖及炎症程度明显大于对照组,干预组介于两者之间。（4）免疫组化测得模型组中Nrf2、NF-KBp65和IKKα/β的阳性表达明显高于对照组,干预组NF-KBp65和IKKα/β介于两者之间,而与Nrf2的表达明显高于模型组,差异有显着性（均P＜0.05）。（5）RT-PCR测得模型组中Nrf2、NF-KB p65和IKKβ的mRNA的表达明显高于对照组,干预组NF-KBp65和IKKβ介于两者之间,而与Nrf2的表达明显高于模型组,差异有显着性（均P＜0.05）,IKKα在三组中都无显着异常。结论（1）采用被动香烟吸入以及气管内注入脂多糖,成功复制了COPD大鼠模型。（2） COPD模型组中15d-PGJ2有抗氧化应激和抗炎症的作用,这一作用可能与Nrf2的增加有关。（3） Nrf2可能通过抑制IKKβ的表达,而抑制NF-κBp65的表达水平。第二部分细胞部分Nrf2通过抑制IKKβ途径下调支气管上皮细胞NF-κBp65和IL-8的表达目的探讨香烟烟雾提取物刺激后支气管上皮细胞后Nrf2的表达,及其是否通过IKKβ途径下调气道上皮细胞NF-κBp65和IL-8的表达。方法培养支气管上皮细胞分为7组A:正常对照组;B:烟草提取物（CSE）刺激组;C:15d-PGJ2预处理后CSE刺激组;D:Nrf2siRNA后CSE刺激组;E:阴性干扰后CSE刺激组F组和G组为IKKInhibitor抑制后的C和D组。首先通过烟草提取物的刺激使细胞氧化应激的水平增加,再通过15d-PGJ2预处理和Nrf2siRNA的方法来增加或降低Nrf2的水平,并用RT-PCR法及westblot的方法观察各组细胞NF-κBp65和IL-8的表达与Nrf2的表达的关系,及抑制IKKs后NF-κBp65和IL-8的表达及与Nrf2的表达的关系。所有结果应用SPSS12.0软件系统进行统计分析。结果（1）支气管上皮细胞在CSE的刺激下,Nrf2、IKKα/β、NF-κb p65以及IL-8的表达水平均有明显升高,差异有统计学意义。（2）在支气管上皮细胞中,PGJ2可增加Nrf2的表达,而Nrf2siRNA可成功抑制了Nrf2的表达。Nrf2的表达增加,同时伴有IKKα/β、NF-κBp65和IL-8的明显降低;Nrf2的表达被抑制后,同时伴有IKKα/β、NF-κBp65和IL-8的明显增加,差异均有统计学意义。这些变化在转录水平和翻译水平是一致的。（3）用IKK inhibitor进行干预后发现,PGJ2仍然可以增加Nrf2的表达,而Nrf2siRNA也可成功抑制了Nri2的表达。在转录水平,IKK被抑制后,IKKα/β、NF-κBp65和IL-8的都有明显的降低,差异有统计学意义,但是并不随着Nrf2的增加而降低,同时也不伴随Nrf2的降低而升高。结论（1）Nrf2在支气管上皮细胞中有抗炎症作用。（2）Nrf2抑制炎症的作用点可能位于IKKs。（3）IKKβ在Nrf2抗炎作用中起关键作用。

刘琳砚^[3]（2008）在《炎症对人肾系膜细胞增殖的影响及曲格列酮的干预机制探讨》文中提出目的:观察曲格列酮对肿瘤坏死因子α（TNF-α）诱导的人肾小球系膜细胞（HMCL）增殖及细胞间黏附分子-1（ICAM-1）mRNA和蛋白表达的影响,探讨曲格列酮在炎症诱导的系膜细胞中的作用及其可能机制,为临床治疗提供药理学靶点和理论依据。方法:将培养的HMCL分为空白对照组,不同浓度TNF-α诱导组,不同浓度曲格列酮干预组,曲格列酮对照组。采用噻唑蓝比色法（MTT）检测各组系膜细胞增殖水平,逆转录-多聚酶链反应（RT-PCR）法检测各组系膜细胞ICAM-1mRNA的表达水平,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各组系膜细胞培养上清中ICAM-1蛋白表达水平,免疫细胞化学（ICC）法检测各组系膜细胞NF-κB蛋白的表达水平。结果:（1）MTT法结果分析:不同浓度TNF-α组系膜细胞增殖水平明显高于空白对照组（P<0.05）,在TNF-α诱导的48h内,于24h呈现增殖高峰,与6h组比较有统计学差异（P<0.05）,各浓度曲格列酮干预组系膜细胞增殖水平明显低于TNF-α诱导组（P<0.05）。（2）RT-PCR结果分析:不同浓度TNF-α诱导组ICAM-1mRNA表达明显增高,与空白对照组比较有统计学差异（P<0.05）,各浓度曲格列酮干预组系膜细胞ICAM-1mRNA表达明显低于TNF-α诱导组（P<0.05）。（3）ELISA结果分析:不同浓度TNF-α诱导组ICAM-1蛋白表达明显增高,与空白对照组比较有统计学差异（P<0.05）,各浓度曲格列酮干预组系膜细胞ICAM-1蛋白表达明显低于TNF-α诱导组（P<0.05）。（4）ICC结果分析:不同浓度TNF-α诱导组NF-κB蛋白表达阳性率明显增高,与空白对照组比较有统计学差异（P<0.05）,各浓度曲格列酮干预组系膜细胞NF-κB蛋白表达阳性率明显低于TNF-α诱导组（P<0.05）。结论:（ 1 ） TNF-α可增强系膜细胞增殖,上调细胞表面ICAM-1mRNA和蛋白的表达,并使NF-κB蛋白的表达增高,提示TNF-α可促进并加重系膜细胞炎症反应。（2）曲格列酮可降低TNF-α诱导的系膜细胞增殖,并下调TNF-α诱导所致细胞表面ICAM-1mRNA和蛋白表达的增高,提示曲格列酮可抑制TNF-α引起的系膜细胞炎症反应。（3）曲格列酮可降低TNF-α诱导的系膜细胞NF-κB蛋白的表达,提示曲格列酮可能通过抑制NF-κB信号传导途径减少TNF-α诱导的系膜细胞ICAM-1的表达。

朱俊^[4]（2005）在《PPAR-γ、COX-2和NF-κB与幽门螺杆菌感染相关性疾病关系的研究》文中研究表明背景与目的:幽门螺杆菌（Helicobacter pylori, Hp）已被确认是慢性胃炎、消化性溃疡的主要致病因子,并与胃癌的发生密切相关,1994 年国际癌症研究机构已将Hp 列为人类Ⅰ类致癌因子,但目前Hp 的确切致病和致癌机制尚不清楚。Hp感染诱发胃黏膜的炎症反应是其引起一切病变的基础,并且它在慢性胃炎→萎缩性胃炎→胃黏膜肠上皮化生、不典型增生→胃癌的演变过程中至始至终起作用。因此研究Hp 感染引起胃黏膜炎症反应及其相关基因的表达和调控机制,对于阐明Hp 相关性疾病的发病机制具有重要意义。Hp 的感染过程中伴随着环氧化酶-2 （cyclooxygenase-2 ,COX-2）、核转录因子KappaB（nuclear transcription factor KappaB,NF-κB）及其它细胞因子的活化,NF-κB 和COX-2 是炎症反应中重要的因子。过氧化酶体增殖因子活化受体-γ（ Peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPAR-γ）作为一种配体依赖性核激素受体激活后可以抑制细胞因子和化学趋化因子分泌;干扰炎症反应的产生和放大;调节细胞分化、增殖和凋亡。PPAR-γ、NF-κB 和COX-2 三者关系密切,NF-KB 活化可上调COX-2 的表达;COX-2 的产物15d-PGJ2是体内PPAR-γ的天然配体;PPAR-γ激活后抑制NF-κB 活化,从而抑制炎症反应。目前关于PPAR-γ与Hp 感染关系少有报道,而Hp 感染胃黏膜中PPAR-γ与NF-κB、COX-2 的相互作用及他们与胃黏膜病变之间关系的研究更是未见报道。为此,本文研究了Hp 阳性和阴性患者的胃黏膜病变不同阶段（浅表性胃炎→萎缩性胃炎→肠化和不典型增生）胃黏膜内PPAR-γ、COX-2 的表达和NF-κB 的活化,及它们与胃黏膜病变之间关系。并观察了Hp 长期感染（10 年以上）胃黏膜内PPAR-γ、NF-κB、COX-2 的变化,以探讨Hp 的致病机理方法: 应用COX-2、PPAR-γ、NF-κB p65 多克隆及单克隆抗体,采用二步法免疫组化方法检测了209 例内镜活检的胃黏膜内COX-2、PPAR-γ的表达和NF-κB的活化。209 例包括:浅表性胃炎（CSG）75 例（其中Hp 阳性50 例,Hp 阴性25例）、萎缩性胃炎（CAG）24 例（其中Hp 阳性13 例,Hp 阴性11 例）、肠化与异型

二、15-deoxy-△~(12,14)-prostaglandin-J_2 induces apoptosis in ECV304 endothelial cells by inhibiting NF-kB and AP-1 activation pathways（论文开题报告）

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

三、15-deoxy-△~(12,14)-prostaglandin-J_2 induces apoptosis in ECV304 endothelial cells by inhibiting NF-kB and AP-1 activation pathways（论文提纲范文）

（1）硝基油酸对缺血再灌注肾损伤细胞模型的保护作用及相关机制（论文提纲范文）

（2）Nrf2在慢性阻塞性肺疾病中的作用及其与IKKα/β的关系（论文提纲范文）

（3）炎症对人肾系膜细胞增殖的影响及曲格列酮的干预机制探讨（论文提纲范文）

（4）PPAR-γ、COX-2和NF-κB与幽门螺杆菌感染相关性疾病关系的研究（论文提纲范文）

四、15-deoxy-△~(12,14)-prostaglandin-J_2 induces apoptosis in ECV304 endothelial cells by inhibiting NF-kB and AP-1 activation pathways（论文参考文献）

• [1]硝基油酸对缺血再灌注肾损伤细胞模型的保护作用及相关机制[D]. 聂蕙斌. 山东大学, 2016(11)
• [2]Nrf2在慢性阻塞性肺疾病中的作用及其与IKKα/β的关系[D]. 李秀英. 中南大学, 2009(02)
• [3]炎症对人肾系膜细胞增殖的影响及曲格列酮的干预机制探讨[D]. 刘琳砚. 重庆医科大学, 2008(01)
• [4]PPAR-γ、COX-2和NF-κB与幽门螺杆菌感染相关性疾病关系的研究[D]. 朱俊. 江西医学院, 2005(08)

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