一、NMDA-Ca~(2+)-NO路径与继发性脑损伤（论文文献综述）
杨锡彤[1]（2019）在《法舒地尔在脑卒中中神经保护作用的机制探究》文中研究表明目的 探究法舒地尔对脑缺血/再灌注损伤的C57BL/6J小鼠起神经保护作用的具体机制,将法舒地尔广泛应用于临床,减轻脑卒中患者的脑组织损伤,为临床上使用法舒地尔治疗和预防脑卒中引起的再灌注损伤提供理论依据。方法 将饲养在大理大学动物中心的C57BL/6J小鼠给予法舒地尔灌胃处理,之后进行大脑中动脉闭塞（middle cerebral artery occlusion,MCAO）动物模型,通过氯化三苯四氮唑染色法（2,3,5-triphenyltetrazolium chloride,TTC）染色分析脑梗死情况,激光散斑（Laser Speckle）图像系统分析脑血流情况;通过检测伊万斯蓝（Evans Blue）和白蛋白（Albumin）的渗出量分析血脑屏障（blood-blood barrier,BBB）通透性的改变,酶谱法用于检测小鼠血液中基质金属蛋白酶9（matrix Metalloproteinases,MMP9）活性的变化,过氧化物酶体激活受体α（peroxisome proliferators-activated receptor alpha,PPARα）的表达通过免疫印迹法检测,超氧化物歧化酶（superoxide Dismutase,SODs）的表达及活性通过实时荧光定量PCR及化学发光法检测。结果 1.C57BL/6J小鼠经过法舒地尔预处理后,脑组织中PPARα和SOD1、SOD2、SOD3的表达水平均升高（P值为0.000,0.000,0.000,0.000）,SODs酶活性也升高（P=0.000）,脑梗死面积明显减少（P=0.000）;2.在小鼠动物模型中经法舒地尔处理后其血液中MMP9活性明显低于羟甲基纤维素（carboxymethyl Cellulose,CMC）对照处理组;3.法舒地尔处理组脑组织中Albumin和Evans Blue渗出量含量与CMC组相比明显降低（P=0.0017,P=0.000）;结论 1.法舒地尔对脑缺血/再灌注的C57BL/6J小鼠进行处理后可促进PPARα的表达,SOD1、SOD2、SOD3的表达水平及活性均增高,从而促进血管的生成,改善脑缺血的脑血流变化,改善侧支循环,减轻脑组织的损伤;2.法舒地尔处理的小鼠脑动物模型脑梗死的面积明显减少,小鼠血液中MMP9的活性降低,MMP9的活性与BBB结构和功能密切相关,法舒地尔通过降低MMP9活性从而维持BBB的结构和功能正常从而保护小鼠脑I/R（缺血/再灌注）的损伤。
郑玄[2]（2019）在《白细胞介素-4在创伤性脑损伤后脑白质结构及功能的损伤与修复中的作用》文中指出第一部分IL-4疗法可以促进TBI（Traumatic Brain Injury）后在脑白质完整性和促进神经功能的恢复。目的 创伤性颅脑损伤是神经外科常见的急重症之一,脑白质的损伤修复在TBI后神经功能恢复中的作用越来越受到重视。白细胞介素（interlukin4,IL-4）是广泛存在于全身免疫系统中的细胞因子,参与多种免疫调节活动。作为一种抗炎性细胞因子,越来越多证据显示,IL-4在中枢神经系统疾病中起着重要的免疫调控作用,但其具体作用机制仍未完全阐明。本部分实验通过建立C57/BL6小鼠CCI（Cortical Control Impact）模型模拟创伤性颅脑损伤,并通过鼻腔内给与IL-4的治疗手段探究IL-4在TBI后的神经功能恢复及白质完整性中的作用。方法 1)建立小鼠CCI模型（TBI）并予以IL-4鼻腔内给药治疗。术后35天通过对比IL-4治疗组和空白对照组及安慰剂组中小鼠的感觉-运动神经功能及高级认知功能,评估IL-4对TBI后小鼠神经功能恢复中的作用;2)术后第35天,通过对比空白对照组、安慰剂组及治疗组中小鼠损胼胝体/外囊的电生理传导功能以判断IL-4治疗在促进TBI后脑白质纤维传导中的作用;3)通过弥散张量成像技术（DTI）和BrdU/APC、MBP/SMI32免疫组织化学染色来判断IL-4疗法对小鼠TBI后白质结构完整性的保护作用;4)对小鼠脑组织切片进行MAP2荧光染色判断TBI后小鼠的神经元缺失程度。结果（1）在感觉-运动神经功能测试中,IL-4治疗后的小鼠与安慰剂组的小鼠在滚轴运动试验（p<0.01）、筒壁攀爬试验（p<0.01）、粘指去除试验（p<0.05）中均表现出更高程度的神经功能恢复;在高级认知功能的测试中,IL-4治疗后小鼠比安慰剂组的小鼠在Morris水迷宫试验（p<0.05）、强迫游泳试验（p<0.001）、悬尾试验（p<0.01）和被动躲避实验（p<0.001）中表现出更高的神经认知功能恢复,但在旷场试验和新物体探索试验中则未表现出明显的统计学差异;（2）与安慰剂组相比,经IL-4治疗的TBI后第35天小鼠损伤部位附近胼胝体/外囊部位的脑白质纤维无论是N1相波还是N2相波都表现出更高的叠加波幅（p<0.05）;（3）与安慰剂组相比,BrdU/APC染色结果显示,胼胝体区 BrdU+/APC+（p<0.001）、BrdU+/APC-（p<0.001）及 BrdU-/APC+（F<0.05）细胞数在IL-4治疗后均有明显增加,外嚢部位各细胞数未见明显统计学差异,脑皮质区 BrdU+/APC+（p<0.01）、BrdU+/APC-（p<0.01）及 BrdU-/APC+（p<0.01）细胞数在IL-4治疗后均有明显增加;纹状体部位BrdU+/APC-（p<0.05）细胞数出现明显增多;SMI132/MBP染色中,SMI32/MBP比值在胼胝体（p<0.01）、皮质（p<0.05）、纹状体（p<0.05）部位表现出了明显降低,DTI检查提示,受损部位附近CC/EC的FA值及Rd值的统计学差异不明显;（4）MAP2荧光染色显示,TBI小鼠在IL-4治疗后脑组织丢失程度未见明显统计学差异。结论 IL-4鼻腔内给药治疗能够促进小鼠TBI后神经功能的恢复,促进损伤部位附近脑白质纤维结构和功能完整性的保留,减少TBI后脑组织的损失。关键词白细胞介素-4;脑损伤修复;脑白质损伤修复第二部分IL-4通过激活PPAR γ诱发OPC向成熟OLs分化并促进再髓鞘化目的 体外试验确定IL-4是否有促进OPCs分化成熟及促进神经元轴突髓鞘化的作用。同时判断PPAR-Y是否为IL-4介导的OPCs分化成熟的关键。体内试验判断PPAR-Y是否为IL-4介导TBI后少突胶质细胞增生神经功能恢复所必需。方法 1)体外OPCs细胞系培养判断IL-4能否促进OPCs增殖分化,神经元-胶质共培养系中加入IL-4共培养,并与空白对照比较判断IL-4是否能够促进神经元轴突的髓鞘化;2)对PPAR-Y基因敲除的小鼠进行TBI后IL-4治疗后,在术后第35天对小鼠脑组织SMI32/MBP染色判断IL-4是否依然能够促进OPCs分化成熟,借此判断PPAR-γ在IL-4介导OPCs分化成熟中的作用;3)建立PPAR-γ基因敲除的小鼠模型,比较 WT+IL-4、WT+vehicle,cKO+IL-4,cKO+vehicle 四组小鼠 TBI 后神经功能恢复的情况,用以判断IL-4介导的神经功能损伤修复过程中,PPAR-γ的作用。结果（1）OPCs原始细胞培养系中加入外源性IL-4后,OPCs细胞出现明显的增殖效应,在神经元-胶质共培养系中加入外源性的IL-4能够促进神经元轴突髓鞘化程度;2)在PPAR-Y基因敲除的小鼠中经IL-4鼻腔内给药治疗后,SMI32/MBP的比值与cKO+vehicle 组相比未见明显统计学差异;3)WT+IL-4、WT+vehicle,cKO+IL-4,cKO+vehicle四组小鼠在TBI后35天神经功能的恢复程度从大到小依次为WT+IL-4>WT+vehicle>cKO+IL-4 ≈ cKO+vehicle。结论 IL-4通过激活PPAR-γ发挥促进OPCs分化成熟及髓鞘形成的作用。PPAR-Y的表达激活是IL-4促进TBI后神经功能损伤修复的关键因素。
黄帆[3]（2019）在《载脂蛋白E对星形胶质细胞NF-κB信号通路及MMP-9作用机制研究》文中提出目的:检测ApoE基因敲除型（ApoE-/-）和野生型（WT）小鼠多发性硬化动物模型脑组织中p65/NF-κ B、MMP-9的表达情况;探索ApoE影响星形胶质细胞分泌MMP-9的可能机制,是否通过TNF-α/NF-κ B炎症通路起调节作用;利用生物信息学技术,探索TNF-α刺激星形胶质细胞的差异基因和关键通路。方法1.免疫诱导野生型和ApoE敲除型小鼠建立EAE模型,免疫组化检测各组小鼠脑组织中MMP-9和p65表达情况,实验动物可分为4组:W-EAE组、W-Control 组以及 E-EAE 组、E-Control 组;2.WT和ApoE-/-小鼠原代星形胶质细胞培养并通过免疫荧光法鉴定星形胶质细胞;3.慢病毒包装siRNA干扰WT和ApoE-/-小鼠原代星形胶质细胞中RelA（p65）基因表达,WT和ApoE-/-星形胶质细胞可分为6组:W-KD组、W-NC组、W-Control 组以及 E-KD 组、E-NC 组、E-Control 组;4.RT-PCR、Western Blot检测p65基因沉默效率,观察p65低表达对星形胶质细胞分泌MMP-9、TNF-α的影响;5.p65低表达后,ELISA、RT-PCR检测 TNF-α干预对WT和ApoE-/-小鼠星形胶质细胞MMP-9表达的影响;6.GEO数据库下载GSE73022,通过KEGG-pathway、蛋白互作网络和GO分析,找出TNF-α对野生型小鼠星形胶质细胞差异基因和富集的关键通路。结果1.根据Weaver’s 15分法的标准进行神经功能评分,慢性期（第35天）ApoE-/-组评分高于WT组（P<0.05）;2.通过免疫组化检测结果显示,与WT-EAE相比,ApoE-/-小鼠EAE脑组织中p65、MMP-9分泌较高（P<0.05）;3.免疫荧光鉴定星形胶质细胞,倒置显微镜观察显示,培养的小鼠原代星形胶质细胞的纯度>90%,可为后续实验细胞;4.mRNA水平和蛋白质水平检测结果,显示慢病毒包装的siRNA能够显着抑制p65在体外星形胶质细胞中的表达（P<0.05）;5.RT-PCR结果显示,与阴性空载组及对照组比较,p65基因沉默组MMP-9呈现低表达（P<0.05）;ELISA结果显示,与正常组小鼠相比,E-KD组和W-KD组星形胶质细胞中的MMP-9的表达水平均降低（P<0.05）,E-KD组星形胶质细胞的MMP-9的表达水平稍高于W-KD组（P<0.05）;6.加入50ng/ml TNF-α 24小时后,ELISA结果显示,与炎症因子处理前比较,NC组和Control组星形胶质细胞的MMP-9表达量升高（P<0.05）;T-KD组星形胶质细胞的MMP-9的表达水平稍高于KD组,但差异无统计学意义（P>0.05）,但ApoE-/-组表达量均高于WT组（P<0.05）;7.R语言分析结果发现,TNF-α刺激星形胶质细胞后,发现上调基因386个,下调基因181个,得到的核心基因包括趋化因子CXCL9/10/11、IL-6、Tnfaip3、MYD88、STAT2等;差异基因富集的通路包括TNF信号通路、Toll样受体信号通路、NF-K B信号传导途径以及NOD样受体信号通路等。结论1.慢性期ApoE缺乏会加重EAE病情,且ApoE-/-小鼠EAE脑组织中p65、MMP-9呈高表达状态;2.p65基因在ApoE-/-小鼠星形胶质细胞中高表达,p65基因沉默能够显着抑制MMP-9、TNF-α分泌水平;3.在促炎因子TNF-α的作用下,星形胶质细胞MMP-9表达增加,说明TNF-α能正向调节星形胶质细胞MMP-9的表达;4.阻断NF-K B途经后,抑制了 TNF-α对星形胶质细胞表达MMP-9的影响,说明TNF-α可通过NF-κ B途径调星形胶质细胞表达MMP-9,且ApoE缺乏会引起星形胶质细胞分泌MMP-9增加;5.关于TNF-α对星形胶质细胞的影响的生物信息学研究,可为抗炎作用在中枢神经系统相关疾病的治疗提供新思路。
闫微[4]（2018）在《大气污染物NO2暴露诱导认知功能损伤及其分子机制研究》文中研究指明NO2是一种重要的空气污染物。室外来源于化石燃料燃烧,汽车尾气是主要排放源,在交通拥堵路段浓度可达0.4 ppm;室内主要来源于燃煤燃气灶的使用和抽烟等,其浓度往往高于室外,室内峰值可达2-4 ppm。空气NO2接触是中枢神经系统（CNS）损伤和疾病发生的潜在危害因子,与成人神经退行性疾病和孩童神经发育疾病密切相关。阿尔茨海默病（AD）是典型的神经退行性疾病之一,临床表现为渐进性记忆衰退和认知功能损伤等。病理学特征主要包括β-淀粉样蛋白（Aβ）沉积和tau蛋白高度磷酸化,线粒体功能障碍是其早期症状。国内外报道指出,交通源污染物或大气环境NO2接触可导致人群脑组织tau蛋白过度磷酸化、Aβ斑块沉积、炎性因子表达升高、神经退行性病变以及学习记忆功能损伤。然以上结果多源于复杂大气环境下的污染物混合暴露模式研究,缺乏NO2单独暴露与疾病发生的实验证据,更缺少对其致病机理的深入解析。为此,本课题拟建立单一污染物NO2动物吸入暴露模型,开展NO2暴露与AD特征性病理损伤的相关性及其分子机制的研究。结果发现:（1）NO2暴露（5、10、20 mg/m3,5时/天,暴露7天）显着上调大鼠皮层组织ROS和脂质过氧化产物MDA水平,引发氧化应激反应,导致线粒体膜损伤、嵴断裂和线粒体溶解等超微结构改变,并浓度依赖性地抑制线粒体呼吸链复合酶II、IV、V活性及ATP的合成,致使线粒体功能紊乱。此外,高浓度NO2可显着降低线粒体生物合成调控因子（PGC-1α、NRF1和TFAM）的蛋白表达,抑制线粒体的自我修复。（2）5 mg/m3 NO2吸入暴露（5时/天,暴露4周）导致正常C57BL/6J和AD模型鼠空间学习记忆功能受损,增加Aβ42的合成及聚积。此过程伴随小胶质细胞、星形胶质细胞异常活化和神经元退行性改变。其间,NO2导致APP/PS1小鼠皮层5,487个基因异常表达。KEGG通路分析显示,差异基因主要富集于突触功能、学习记忆、Aβ产生及花生四烯酸（AA）代谢等路径。在NO2染毒期间注射JZL184（8 mg/kg体重）,可通过抑制单酰基甘油脂肪酶（MAGL）活性提高内源性2-花生四烯酸甘油酯（2-AG）含量并降低AA代谢产物,缓解因暴露所致神经炎症、神经元退行、Aβ42沉积及学习记忆功能障碍。（3）5 mg/m3 NO2暴露（5时/天,暴露4周）导致脑组织胰岛素信号传导路径（IRS-1-AKT）紊乱,干扰下游糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）活性,引起tau蛋白过度磷酸化,降低谷氨酸受体及突触后致密物表达。与此同时,NO2激活MAPK/JNK通路导致脑、肝脏、骨骼肌IRS-1-AKT路径异常,引发系统性胰岛素抵抗,并代偿性增加血清胰岛素水平,进一步恶化脑内胰岛素信号损伤,导致tau蛋白磷酸化增加。以上结果提示,NO2吸入暴露可导致线粒体结构及功能损伤、Aβ异常聚集,tau蛋白过度磷酸化以及认知功能障碍等AD型病理损伤发生。ROS过量产生与线粒体损伤形成恶性循环放大氧化应激是病理损伤的始因,随后触发不饱和脂肪酸AA代谢异常及胰岛素信号传导障碍,致使Aβ42过表达及tau磷酸化增加可能是导致神经功能障碍的重要机制。空气污染物可导致CNS损伤已成共识。近期研究提示,大气污染物诱导神经功能障碍和疾病发生不仅与本体直接暴露有关,可能还与母体孕期接触导致子代发育毒性相关。尽管有报道指出,母体妊娠期暴露于交通源或大气环境NO2可引起不良出生结局,干扰胎儿神经发育过程,造成儿童神经行为异常,增加孩童期多种神经认知损伤疾病（如自闭症,精神分裂症,发育迟缓和认知障碍）的患病风险,然此类研究主要集中于多种污染物共存下神经行为和认知功能的流行病学检测,关于单一污染物暴露与子代神经发育障碍的相关性及毒性作用机制还未有涉及。因此,本课题建立孕期NO2动物暴露模型,以子代空间学习记忆功能改变为终点,基于基因表达谱探讨NO2导致子代神经发育异常的毒性特征及分子机制。结果发现:孕期NO2吸入暴露导致子鼠性别差异性基因转录异常、组织病理学改变和神经认知功能障碍,仅雄性子鼠在断乳期出现差异基因的GO功能富集、神经元坏死和凋亡、以及空间学习记忆能力下降。在14个持续变化的mRNA中,ApoE基因在雄鼠中特异性高表达,是NO2诱导神经发育毒性的关键基因。此外,孕期NO2暴露导致断乳期雄鼠皮层组织性别差异性长链非编码RNA（lncRNA）转录异常;构建lncRNA-mRNA共表达网络进行KEGG路径分析显示,雄性子鼠lncRNA主要参与AD和氧化磷酸化通路。其中,共表达mRNA数目最多的关键lncRNA—肺腺癌转移相关转录本1（Malat1）,可结合转录因子NF-κB上调ApoE基因导致雄性子鼠认知功能障碍。
綦雪巍[5]（2016）在《夹脊电针联合MP调控NMDAR/Calpain通路相关蛋白抑制ASCI大鼠微环境神经细胞凋亡作用机制研究》文中研究指明目的：通过实验研究确定夹脊电针联合甲基强的松龙（Methylprednisolone,MP）治疗急性脊髓损伤（Acute spinal cord injury, ASCI）大鼠早期干预时间点,并观察夹脊电针联合MP早期干预对ASCI大鼠微环境NMDAR/Calpain信号通路及神经细胞凋亡的影响,试图揭示夹脊电针联合MP治疗ASCI大鼠的作用机制,为夹脊电针联合MP的神经保护作用及促进神经再生作用提供理论依据。方法：实验研究分为三部分。第一部分：观察急性脊髓损伤（ASCI）大鼠神经细胞凋亡最早出现时间,明确早期干预时间点。48只雌性Wistar大鼠,随机平均分为假手术组（Sham）和急性脊髓损伤组（ASCI）,每组又分为1h、3h、6h、8h四个亚组。于造模后相应时间点将各组大鼠处死取材。HE染色观察大鼠脊髓组织病理形态学变化；TUNEL染色检测大鼠神经细胞凋亡情况,筛选出神经细胞凋亡出现最早时间点,确定早期干预的最佳时间点。第二部分：对比分析夹脊电针（EA）及甲基强的松龙（MP）对ASCI大鼠的治疗效果,优化治疗方案。144只雌性Wistar大鼠,随机平均分为Sham组、ASCI组、EA组、MP组、EA+MP组和MDL28170组,每组又分为1天、3天、7天、14天四个亚组。BBB评分观察不同治疗方法对ASCI大鼠运动功能影响HE染色观察不同治疗方法对ASCI大鼠脊髓组织病理学影响；TUNEL染色检测不同治疗方法对大鼠神经细胞凋亡影响；比较EA组、MP组、EA+MP组、MDL28170组不同的治疗效果,筛选最佳治疗方案。第三部分：分析夹脊电针联合MP对ASCI大鼠NMDAR/Calpain信号通路及神经细胞凋亡的影响。120只雌性Wistar大鼠,随机平均分为Normal组（仅做Western blot检测）、Sham组、ASCI组、EA+MP组、MDL28170组,每组又分为1天、3天、7天、14天四个亚组。Nissl染色观察各组大鼠脊髓组织神经元尼氏小体的变化；免疫组化和Western blot检测脊髓组织NMDAR/calpain通路相关因子NMDA-NR1、calpain-2、cleaved caspase-3的表达,以明确大鼠ASCI后该通路各因子的变化对神经细胞凋亡的影响。结果：第一部分：（1）HE染色结果显示,ASCI组大鼠术后1h和3h可见灰质小灶性斑片状出血,大部分细胞未见明显变化,结构较清晰,仅见数个细胞萎缩,偶见神经元水肿；术后6h可见广泛出血,组织间隙变大,细胞形态改变明显,胞体变小,结构不清,胞核固缩碎裂,神经细胞出现凋亡；术后8h较6h细胞损伤加重,胞核固缩更加明显,细胞变小,仅见残存的神经细胞。（2）TUNEL检测显示,ASCI组术后6h细胞形态明显改变,多极形消失,细胞核裂解,染色质分割成块状,可见凋亡小体出现,损伤区神经元数量减少,可见散在凋亡神经细胞,与Sham组比较差异显着（P<0.05）；8h细胞进一步固缩,细胞间隙变大,残存的神经元变少,神经凋亡细胞明显增多,与Sham组比较差异显着（P<0.05）。第二部分：（1）BBB评分结果显示,术后3d、7d、14d,与ASCI组比较,EA组、MP组、EA+M P组、MDL28170组大鼠肢体运动功能评分升高,差异显着（P<0.05）。术后14d,与EA组、MP组、MDL28170组比较,EA+MP组大鼠肢体运动功能评分升高,差异显着（P<0.05）。（2）HE染色结果显示ASCI组大鼠1d时出血明显,可见大量凋亡神经细胞；3d时细胞破坏最明显,可见大量凋亡神经细胞,核仁消失,核固缩；7d时神经细胞凋亡有所减轻,神经细胞坏死,正常神经细胞数量减少,胶质细胞增生,炎性细胞浸润14d时凋亡已不明显,可见空泡存在,其余4治疗组神经细胞损伤情况较ASCI组明显减轻,尤以EA+MP组神经细胞保存较完好。（3） TUNEL检测可见,Sham组未见明显神经细胞凋亡,与EA组、MP组、EA+MP组、MDL28170组相比,具有显着差异（P<0.05）。与ASCI组相比,术后3d、7d、14d,EA组、MP组、EA+MP组、MDL28170组神经细胞凋亡减少,差异显着（P<0.05）。与EA组、MP组、MDL28170组比较,术后7d、14d,EA+MP组神经细胞凋亡减少,差异显着（P<0.05）。第三部分：（1）Nissl染色结果可见,ASCI组大鼠1d时神经元胞体肿胀变形,尼氏小体肿胀破碎,神经元数量减少；3d时神经元胞体破坏明显,核仁消失,受损神经元明显增多；7d时神经元紧缩,尼氏小体溶解破碎,数量减少；14d时神经元紧缩更加明显,胞浆深染。其余4治疗组神经元损伤情况较ASCI组明显减轻,EA、MP、EA+MP、MDL28170治疗均能降低神经元损伤程度,改善神经细胞形态,防止尼氏小体破碎溶解,增加其数量,尤以EA+MP组疗效显着。（2）免疫组化结果显示,术后3d,与ASCI组比较,EA+MP组和MDL28170组NMDA-NR 1、calpain-2、cleaved caspase-3表达降低,差异具有统计学意义（P<0.05）；术后7d、14d,与MDL28170组比较,EA+MP组NMDA-NR1、calpain-2、cleaved caspase-3表达降低,差异具有统计学意义（P<0.05）。（3）Western blot结果显示,术后3d,与ASCI组比较,EA+MP组和MDL28170组NMDA-NR1、calpain-2、cleaved caspase-3蛋白表达减少,差异具有统计学意义（P<0.05）；术后7d、14d,与MDL28170组比较,EA+MP组NMDA-NR1、calpain-2、cleaved caspase-3表达减少,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论：（1）急性脊髓损伤后6h以内是夹脊电针早期干预时间窗。（2）夹脊电针联合MP能改善ASCI大鼠运动功能评分,减少神经细胞凋亡,减轻脊髓继发性损伤。（3）大鼠急性脊髓损伤后兴奋性氨基酸毒性被激活,抑制ASCI大鼠微环境中calpain-2表达可以减少神经细胞凋亡,提示NMDAR/Calpain通路介导了ASCI大鼠神经细胞凋亡发生。（4）夹脊电针联合MP可以通过下调NMDA-NR1.calpain-2表达,抑制兴奋性氨基酸毒性,从而下调cleaved caspase-3的表达,抑制神经细胞凋亡,改善微环境,减轻脊髓继发性损伤,优于其它治疗组。
赵婷[6]（2016）在《基于ZL006体内代谢研究的抗脑卒中新药发现》文中指出脑卒中目前已成为全世界范围内第二大致死致残的疾病,对人类健康危害严重。缺血性脑卒中由于亲发病机制复杂,缺乏确切有效的临床治疗方法,成为世界范围内继续攻克的健康难题。缺血性脑卒中发生后,兴奋性神经递质谷氨酸激活兴奋中枢上的NMDA受体。NMDA受体过度活化后,通过NR2B亚基介导PSD95与nNOS相连,形成NR2B-PSD95-nNOS通路,促进大量NO的合成与释放。过量NO会造成神经元死亡,损伤脑组织。通过前期研究,本课题组得到了一个活性PSD95-nNOS解偶联剂——ZL006,该化合物可以在不影响NMDA受体及nNOS正常生理功能的前提下,有效阻断PSD95与nNOS连接,抑制NO的过度产生与释放,从而最大程度的减少对脑组织损伤,发挥有效的神经保护作用。对化合物ZL006的小鼠体内药代动力学研究发现,该化合物存在代谢较快及入脑能力差的缺陷。通过对其排泄产物的研究,发现ZL006主要通过原型药物或与葡萄糖醛酸结合的形式排出体外。因此课题组对ZL006结构进行研究,寻找出所有潜在的葡萄糖醛酸结合位点,逐一进行取代,直至发现葡萄糖醛酸的主要结合位点。同时通过结构改造,探索增加ZL006入脑能力的方式。本论文共完成7个化合物的体内药代动力学研究,包括血浆及脑组织原型药物和代谢出的ZL006浓度随时间变化的数据。化合物包括:ZL006、ZL006甲酯、ZL006 乙酯、ZL006 环己酯、ZL006-M1、ZL006-M2、ZL006-M3。通过全面的药代动力学,初步发现葡萄糖醛酸的主要结合位点可能为ZL006左侧酚羟基,同时发现成酯改造能极大改善其入脑能力,且随着成酯基团的增加,化合物代谢逐步减缓,入脑能力逐步加强。因此该两个位点的联合改造,可能是改善ZL006成药性的关键。
张艳婷[7]（2016）在《健脑益智胶囊对TBI后大鼠学习记忆及海马区CaMKⅡ表达的影响》文中提出目的:通过观察不同干预条件下不同组别的颅脑损伤（Traumatic brain injuries,TBI）后大鼠空间辨别性学习记忆能力改变,海马神经元形态改变及Ca MKⅡ表达的影响,进一步探讨基于“豁痰化瘀利水”大法的健脑益智胶囊对TBI后大鼠空间辨别性学习记忆能力改变以及海马神经元形态改变、Ca MKⅡ的表达是否具备干预效应。方法:选SD大鼠（8周龄）180只,随机划分为5大组,分别为A（假手术组）、B组（模型组）、C组（中药组）、D组（脑复康组）、E组（空白组）。单组按采集脑组织标本的时序分为例如A1-A5的亚组;造模均采用电子颅脑损伤仪（e CCI）进行TBI造模,A组（颅骨钻孔术后见完整硬膜,不打击）;B组（造模后常规喂养,不予处理）;C组（造模后,给以中药健脑益智胶囊灌胃,给药3次/日,配置规格:0.75g/ml混悬液）;D组（造模后,给以西医脑复康片灌胃,给药3次/日,配置规格:0.09g/ml混悬液）;E组（仅给予常规喂养）。运用行为学检查法水迷宫（Morris water maze）记录造模前及造模后给予相应干预的模型大鼠在第24h、3d、5d、7d、14d的逃避潜伏期和穿越平台次数等行为学指标的影响,并在规定节点24h、3d、5d、7d、14d后在相应亚组采集脑组织标本,进行HE染色,镜下观察摄片,部分用Ca MKⅡ免疫组化分析。结果:本次实验造模成功,按照NSS评分筛选,大鼠脑功能均中重度缺损。总共致死48只大鼠（致死率27.0%）。所有大鼠造模前均脑功能完整,造模后,首日均表现学习和记忆能力变差。1.水迷宫结果:模型组大鼠在各时间点逃避潜伏期明显长于其他各组,穿越平台次数明显小于其他各组,差异有统计学意义（P<0.05）;第24h-3d内B、C、D两两比较无统计学差异。第5天,B组和C组有统计学差异（p<0.05）,C组优于B组;B组和D组无统计学差异（p>0.05）;C组与D组无统计学差异（p>0.05）。第7天,B组与C组、D组均有统计学差异,但C组与D无统计学差异。第14天B、C、D三组比较两两均有统计学差异,其中潜伏期时间B组>A组>D组>C组,穿越平台次数B组<A组<D组<C组,有统计学意义,A与E两组无统计学差异;2.HE染色24h-5d可见挫伤灶细胞周围见大量液化坏死、炎性细胞浸润,C、D组较其他组有神经元和微血管数量较多。7-14天时发现水肿较前减轻,但仍有大量炎性细胞浸润及胶质细胞增生,C组、D组神经元及周围微血管数量均高于模型组;3.脑损伤后不同时间Ca MKII平均光密度值比较:A和E组无统计学差异,B、C、D组大鼠的脑组织标本中在24h-3d内可检测到Ca MKll的高度表达,无明显差异（p>0.05）。5天再次检测发现各组大鼠脑组织内Ca MKll细胞阳性率开始下降,B组和C组有差异（p<0.05）,C组优于B组;B组和D组无差异（p>0.05）,C组与D组无差异（p>0.05）。7-14天检测发现B组Ca MKll表达水平仍高于其他各组,B、C、D组两两比较有统计学差异（p<0.05）,其中平均光密度值B组>D组>C组>A组,有明显统计学差异（p<0.05）。结论:1.健脑智胶益囊可以使TBI后大鼠学习记忆神经行为学有所改善,在行为学宏观上说明了其对学习记忆障碍的治疗作用;2.健脑智胶益囊可能通过促进海马区神经元再生和稳定内环境,促进神经元和微血管数量增加,从而改善学习记忆障碍;3.健脑益智胶囊可抑制Ca MKⅡ表达,可能诱导该酶恢复活性,减轻或抑制神经元损伤和保护脑功能以及促进损伤后学习记忆障碍的恢复。
王春平[8]（2010）在《静脉麻醉药抑制利多卡因致大鼠惊厥作用的比较》文中进行了进一步梳理目的:应用盐酸利多卡因致大鼠中毒惊厥模型,观察中毒惊厥抑制后海马c-fos阳性细胞表达、一氧化氮（NO）含量和一氧化氮合酶（NOS）活性的变化,比较静脉麻醉药咪达唑仑、异丙酚、依托咪酯及硫喷妥钠抑制利多卡因致大鼠惊厥的作用。方法:健康雄性Wistar大鼠36只,体重250±20g（河北医科大学实验动物中心提供）。随机分为6组,每组6只。大鼠于实验前放置在安静、舒适环境内24 h以上,实验操作时力求轻柔,尽量保持基础状态的稳定。10%水合氯醛350mg/kg腹腔注射麻醉大鼠,使大鼠仰卧位固定在实验平台上,进行尾静脉穿刺,置管成功后外接肝素帽。为排除戊巴比妥钠对实验结果的影响,于第2天动物麻醉完全清除﹑清醒状态下输注药物。实验时按不同的分组给予不同的处理。空白对照（C）组,以3ml?h的速度泵入生理盐水;利多卡因（L）组,以4 mg·kg-1·min-1的速度经尾静脉持续泵入2%的利多卡因,直到出现全身不自主或不协调的抽搐时停止泵入局麻药,然后经尾静脉输注3ml?h生理盐水;利多卡因+异丙酚（P）组,利多卡因+依托咪酯（E）组,利多卡因+咪达唑仑（M）组,利多卡因+硫喷妥钠（T）组,输入利多卡因的速度及停止时间均与L组相同,各组分别于惊厥发生即刻缓慢（15秒）静脉推注异丙酚12.5㎎?㎏、依托咪酯1.85㎎?㎏、咪达唑仑0.65㎎?㎏、硫喷妥钠30.85㎎?㎏,然后继续静脉输注3ml?h生理盐水至实验结束。各组均给以面罩吸氧。观察行为学变化,并依据Racine分级法对大鼠进行行为学评分。记录利多卡因致惊厥的剂量及惊厥持续时间。标本采集及处理惊厥后2h大鼠深麻醉下快快速断头处死大鼠,打开颅腔,取出脑组织,冷生理盐水冲洗。根据大鼠立体定位图谱,取双侧海马。一侧海马放入4%的多聚甲醛后,常规脱水、浸蜡、包埋,5μm厚连续冠状切片。c-fos免疫组化测定按照EliVision puls免疫组化染色试剂盒进行。最后的标本片在光镜下（10×40）计数5个视野的棕黄色阳性细胞数量,计算出平均数和标准差,数据以x±s表示,采用SPSS 13.0软件进行单因素方差分析,P < 0. 05表示差异有显着性。另一侧海马取出后迅速放入液氮中冷冻待测。测量时以冷生理盐水作均浆介质,研磨成10%的组织均浆,以3000r?min离心20min,取上清液测量。NO的测定采用硝酸还原酶法:NO与分子氧反应生成NO2-,并转化成NO3-和NO2-采用还原法使NO3-还原为NO2-,测定NO2-的量可作为NO生成的良好指标。NOS活性用分光光度法测定。匀浆蛋白用考马斯亮蓝法测定。结果:1各组大鼠体重比较无统计学意义2除空白对照组外,各组均出现了惊厥,以4 mg·kg-1·min-1的速度经尾静脉持续泵入2%的利多卡因后约2min,首先出现行动迟缓、呆滞,逐渐发展为面部抽搐、点头样运动,尾巴僵直并翘尾。8-10min后开始出现四肢强直性抽搐,站立不稳、跌倒,发展为持续的全身性强直发作。若不及时处理,可能会因抽搐致呼吸衰竭而死亡。利多卡因组惊厥持续约半分钟到一分钟,能自行停止,若惊厥致死则弃之。其它各组给予静脉麻醉药后很快抑制惊厥（多在15秒内）,如头面部及四肢抽搐甚至角弓反张消失,呼吸急促转为平稳而无呼吸抑制,并进入嗜睡状态,甚至有些大鼠在15秒静推麻醉药过程中即抑制惊厥,从整体表现以及时间观察,静脉麻醉药各组抑制惊厥发生的表现没有明显的区别。3各组在利多卡因致大鼠惊厥时的潜伏期无统计学意义,且利多卡因持续泵入致惊厥的剂量为39.25±2.63㎎?㎏。4各组间海马c-fos表达的比较与对照组相比,利多卡因组c-fos阳性细胞数显着增加（P<0.05）,且分布密集染色较深;四种静脉麻醉与利多卡因组相比c-fos阳性细胞计数均显着降低（P<0.05）,且分布稀疏染色较浅。咪达唑仑组与硫喷妥钠组c-fos阳性细胞数显着低于异丙酚组与依托咪酯组（P<0.05）,表明咪达唑仑与硫喷妥钠的抗惊厥效果优于异丙酚与依托咪酯。而异丙酚组与依托咪酯组之间、咪达唑仑组与硫喷妥钠组之间c-fos阳性细胞数进行两两比较无显着差异（P>0.05）。5各组NO含量比较利多卡因组NO含量与对照组比较有显着性差异（P<0.05）。异丙酚组、依托咪酯组、硫喷妥钠组和咪达唑仑组海马NO含量均低于利多卡因组（P<0.05）,表明异丙酚组、依托咪酯组、硫喷妥钠组、咪达唑仑组均可产生抗惊厥效应。对各处理组NO含量进行两两比较:咪达唑仑组与硫喷妥钠组NO含量低于异丙酚组与依托咪酯组NO含量,差异有显着性（P<0.05）,表明咪达唑仑与硫喷妥钠的抗惊厥效果更显着。但异丙酚组与依托咪酯组NO含量比较无显着差异,咪达唑仑组与硫喷妥钠组NO含量比较无显着差异（P>0.05）。6各组间NOS活性的比较与空白组相比,利多卡因组活性显着增高,其他各组NOS活性较空白组也有显着增高。但同利多卡因组比较,静脉麻醉药处理组NOS活性有所下降。对各处理组NOS活性进行两两比较:咪达唑仑组与硫喷妥钠组NOS活性低于异丙酚组与依托咪酯组NO含量,差异有显着性（P<0.05）,但异丙酚组与依托咪酯组NOS活性比较无显着差异,咪达唑仑组与硫喷妥钠组NOS活性比较无显着差异（P>0.05）。结论:静脉麻醉药咪达唑仑、异丙酚、依托咪酯及硫喷妥钠均可有效抑制利多卡因致惊厥作用,其中咪达唑仑与硫喷妥钠效果显着。
秦科[9]（2009）在《体外循环对神经细胞损伤和神经节苷脂的脑保护作用及机制》文中提出近年来,虽然随着医疗设备与技术的不断进步,心脏外科总的死亡率和并发症在持续下降,但术后神经并发症的发生率却基本无变化,明显的和亚临床的围手术期脑损伤依然是一个未解决的问题。而目前对体外循环（CPB）相关的脑病理生理变化和脑的并发症的发生机制仍缺乏深入的了解,对神经系统并发症仍缺乏有效的治疗和预防措施,因此CPB的脑损伤和脑保护一直是人们研究的热点。本研究以SD大鼠为实验动物,经颈静脉引流,尾动脉灌注,成功建立了经济、预充量小、可靠、重复性好的小动物CPB模型,从形态功能学、分子生物学等方面对CPB对神经细胞损伤和单唾液酸神经节苷脂（GM1）的脑保护作用及机制研究进行了探讨。同时在临床上,通过研究GM1对老年患者CPB下心脏手术围术中S100B、Tau蛋白的变化及对脑氧代谢的影响,探讨GM1是否具有脑保护作用及可能机制。（一）大鼠CPB模型的建立选用成年健康雄性SPF级SD大鼠,利用特制微型动物膜式氧合器,经右颈静脉插管引流,尾动脉插管灌注建立小预充量的CPB,转流时间l h,股动脉插管监测血流动力学指标及血气、电解质的变化。结果显示,90%大鼠顺利建立CPB模型,CPB期间血流动力学稳定,动脉血气及电解质指标正常,基本达到理想的CPB标准。停机后呼吸和心血管循环功能顺利恢复,获得了24小时的较长时间生存。本方法建立的大鼠CPB模型切实可行,具有简单实用、重复性好的特点,是进行CPB相关性脏器损伤,尤其是脑损伤机制研究可靠的实验平台。（二）形态功能学的动物基础研究成年健康雄性SPF级SD大鼠随机分为CPB组、CPB+GM1组、输血组和假手术组。建立大鼠CPB模型,在预充液中加入GM1 20 mg/kg。24 h后取脑组织进行检测。（1）采用透射电镜技术观测海马和皮层的超微结构,以探讨GM1对CPB脑损伤的保护作用。结果示,CPB后神经细胞出现粗面内质网和游离核糖体明显减少,线粒体肿胀,空泡化,嵴断裂,溶解,消失,细胞膜崩解;神经丝模糊、突触间隙模糊不清,出现较多神经细胞凋亡。GM1干预后神经细胞的超微结构轻度改善,突触间隙增宽,凋亡细胞减少。（2）研究CPB后脑组织的氧化应激反应的变化及GM1干预后对其的影响。结果显示,CPB后脑组织中,乳酸脱氢酶由正常的38.21±3.61（U/mg）增加到62.17±6.71（P<0.01）,给予GM1后下降到51.63±5.92（P<0.05）,与CPB组比较有显着差异（P<0.05）;MDA由正常的2.14±0.81（nmol/mg）升高到6.76±1.31（P<0.01）,给予GM1后下降到4.53±0.93（P<0.05）,与CPB组比较有显着差异（P<0.05）;而SOD、GSH-Px的活性分别由正常的1173.72±268.75、128.32±42.74（mmol/h/mg）降低到586.74±133.46、73.19±18.67（P<0.01）,给予GM1后分别回升到723.19±189.65、89.41±22.16,与CPB组比较有显着差异（P<0.05）。提示CPB脑损伤的过程中氧自由基是重要的致病因素,GM1可以明显减少氧自由基的产生和促进SOD、GSH-Px的产生。（3）观察CPB后脑组织的的Na+-K+-ATP酶活性变化及神经节苷脂干预后对其的影响。结果显示,CPB组脑组织中的Na+-K+-ATP酶活性由正常的17.03±4.17（mol·Pi/g·protein/h）下降到12.45±2.64（P<0.01）,CPB+GM1组下降到14.72±3.29（P<0.05）,与CPB组比较有显着差异（P<0.05）。提示CPB可抑制Na+-K+-ATP酶活性,GM1可起到稳定细胞膜Na+-K+-ATP酶的作用。（4）研究CPB后脑组织的NOS活性的变化及GM1干预后对其的影响。结果显示,CPB组脑组织中的iNOS活性由正常的16.47±2.52（pmol/mg/prot/min）增加到69.84±8.73（P<0.01）,CPB+GM1组则增加到57.86±7.79（P<0.01）,与CPB组比较有显着差异（P<0.05）;CPB组脑组织中的cNOS活性由正常的57.74±8.78（pmol/mg/prot/min）下降到32.67±6.61（P<0.01）,CPB+GM1组则下降到42.72±7.23（P<0.05）,与CPB组比较有显着差异（P<0.05）;CPB组脑组织中的NO含量由正常的258.91±48.17（pmol/mg·prot）增加到713.74±98.43（P<0.01）,CPB+GM1组则增加到523.74±87.36（P<0.01）,与CPB组比较有显着差异（P<0.05）。提示CPB脑损伤与iNOS产生大量的NO导致的神经毒性作用有关;GM1在一定程度降低了脑中活化的iNOS含量,减少了NO的分泌释放,具有一定的脑保护作用。（5）基于分子生物学及酶联免疫吸附测定技术,研究CPB后海马、皮层炎性因子表达的变化及GM1干预后对其的影响。结果显示,海马、皮层TNF-α、IL-1β、ICAM-1和IL-10 mRNA表达在假手术组和输血组的表达水平低,两组间差异无显着性（P>0.05）;在CPB组和CPB+GM1组,海马、皮层TNF-α、IL-1β、ICAM-1和IL-10 mRNA表达水平均明显增加（P<0.05或P<0.01）,同时海马的表达量较皮层的表达量更明显（P<0.05）,但两组间差异无显着性（P>0.05）。可见,CPB可诱导海马、皮层TNF-α、ICAM-1、IL-1β、IL-10 mRNA表达,导致相应的细胞因子蛋白分泌增加,从而启动了炎症反应途径,引起脑损伤,尤其以海马损伤更明显。GM1不影响脑组织TNF-α、ICAM-1、IL-1β、IL-10 mRNA表达,不能导致相应的细胞因子蛋白分泌减少;GM1的脑保护作用不是通过抑制炎症反应的途径来起作用的。（三）临床研究观察研究GM1对老年患者CPB心脏手术围手术期中S100B、Tau蛋白的变化及对脑氧代谢的影响,从而探讨其是否具有脑保护作用及可能机制。择期在CPB下行主动脉瓣和/或二尖瓣置换术的患者40例,年龄>60岁,随机分为对照组和GM1组,每组20例。分别于转机前（T0）、主动脉阻断后5分钟（T1）、主动脉开放后5分钟（T2）、停机后即刻（T3）、停机后60分钟（T4）、停机后24 h（T5）测颈内静脉球部、桡动脉血气,计算出脑氧供和氧耗比值（CBF/CMRO2）及脑氧耗和脑糖耗比值（CMRO2/CMRGLU）。用ELISA法测定颈内静脉球部血清中S100B、Tau蛋白水平。结果显示,GM1组在T1、T2、T3、T4、T5与对照组相比,血清S100B、Tau蛋白的浓度均下降并有统计学明显差异（P>0.05）。SjvO2变化:与T0比较,T1时两组均升高,T2、T3、T4下降,停机24h恢复正常;组间比较,对照组于T2、T3、T4下降较GM1组明显（P<0.05）。CBF/CMRO2变化:与T0比较,T1时两组均升高,T2、T3、T4下降,停机24h恢复正常;组间比较,T2、T3、T4下降较GM1组明显（P<0.05）。CMRO2/CMRGLU变化:与T0比较,T1时两组均升高,T2、T3、T4下降,停机24h恢复正常;组间比较,对照组于T2、T3、T4下降较GM1组明显（P<0.05）。提示老年患者CPB术后S100B、Tau蛋白释放明显增加,CPB可导致脑氧代谢的过程性失衡,标记反映老年患者CPB后的脑损伤;GM1可以减少S100B、Tau蛋白的表达分泌,能够更好地维持CPB过程中的脑氧供需平衡,起到一定的脑保护作用。综上所述,动物实验和临床检测均显示CPB可导致一定程度的脑损伤,CPB脑损伤的机制与氧化应激、抑制Na+-K+-ATP酶活性、iNOS介导的NO神经毒性作用以及炎症反应、脑氧供需过程性失衡有关。GM1通过减轻CPB导致的神经细胞形态学改变,抑制氧化应激和iNOS,提高Na+-K+-ATP酶活性,稳定脑氧供需平衡而起到一定的脑保护作用。
陈霞[10]（2009）在《红景天苷对神经元损伤的保护作用及机制的研究》文中研究指明兴奋性氨基酸尤其是谷氨酸（Glutamate, Glu）引发的神经兴奋毒性在缺血性脑损伤中占有相当重要的地位,因而减轻Glu兴奋性毒性,保护神经元成为缺血性脑损伤的重要治疗策略之一。本研究探讨了红景天苷对兴奋性毒性损伤神经元的保护作用及可能的作用机制。第一部分红景天苷对Glu损伤的保护作用及机制的研究目的:观察红景天苷对原代培养海马神经元Glu兴奋性毒性损伤的保护作用及作用机制。方法:1.通过镜下形态分析和MTT比色法,观察红景天苷对原代培养海马神经元形态和活力的影响。2.通过镜下形态观察和MTT比色法检测细胞活力,摸索诱导Glu兴奋性毒性的适当浓度及时间,建立原代培养海马神经元谷氨酸兴奋性毒性损伤模型。3.通过形态学分析、细胞活力的MTT检测、LDH释放量的检测,观察红景天苷预处理对谷氨酸损伤后海马神经元形态和细胞活力的影响。4.通过Hoechst染色、TUNEL标记和Annexin V+PI的流式分析,观察红景天苷预处理对Glu损伤的海马神经元凋亡的影响。5.通过western blotting检测,观察红景天苷预处理对Glu损伤海马神经元凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax蛋白表达的影响。6.通过使用Caspase-3抑制剂Z-DEVD-FMK预处理,MTT检测Glu损伤后海马神经元活力,观察凋亡执行分子Caspase-3是否参与Glu诱导的兴奋性毒性。7.通过比色法检测Caspase3活性,评价Glu损伤后不同时间细胞凋亡的程度及红景天苷预处理对Glu诱导的Caspase-3活性的影响。8.钙离子荧光探针Fluo-4/AM标记海马神经元,激光共聚焦显微镜下检测红景天苷对Glu诱导的[Ca2+]i变化的影响。结果:1.不同浓度的红景天苷与海马神经元共培养24h,海马神经元生长状态良好,随着红景天苷浓度的增加,神经元活力呈增加趋势,但与空白对照相比无明显统计学差异。2.细胞活力检测、Hoechst染色、TUNEL染色和caspase-3活性测定结果一致表明,Glu诱导了神经元凋亡;红景天苷预处理可抑制Glu诱导的神经元凋亡,呈现良好的量效关系。3.125μmol/LGlu损伤15min不影响Bcl-2和Bax蛋白的表达,红景天苷预处理24h也不影响这两个蛋白的表达。4.红景天苷预处理24h能显着降低Glu诱导的胞浆Ca2+超载。结论:红景天苷预处理24h可明显改善Glu损伤后细胞活力,减少LDH的释放,抑制Glu诱导的细胞凋亡,对Glu损伤的海马神经元有明显的保护作用,其机制与抑制Glu损伤后的caspase-3活性增加和Ca2+超载有关。第二部分红景天苷对NMDA损伤的保护作用及机制的研究目的:观察红景天苷对原代培养海马神经元NMDA兴奋性毒性损伤的保护作用及作用机制。方法:1.通过MTT检测,观察不同浓度NMDA对海马神经元细胞活力的影响,建立原代培养海马神经元NMDA兴奋性毒性损伤模型。2.通过形态学分析、细胞活力的MTT检测、LDH释放的检测,观察红景天苷预处理对NMDA损伤后海马神经元形态和细胞活力的影响。3.通过NF染色、TUNEL标记和Caspase-3活性的检测,观察红景天苷预处理对NMDA诱导的海马神经元凋亡的影响。4.RT-PCR检测红景天苷对海马神经元NR2A、NR2B、NR2C和NR2D mRNA表达的影响。5.Western blotting分析红景天苷对NMDA损伤海马神经元PSD-95蛋白表达的影响。6.Western blotting分析红景天苷对NMDA损伤海马神经元p38蛋白表达的影响。7.全细胞膜片钳技术检测红景天苷对NMDA诱发电流（INMDA）的影响。8.通过比色法检测培养上清中NO含量和NOS活性,探讨红景天苷对NMDA损伤海马神经元保护作用机制。9.通过MTT比色法检测细胞活力,观察红景天苷对SNP（NO供体）损伤海马神经元的保护作用。结果:1.细胞活力检测、NF染色、TUNEL染色和caspase-3活性测定结果一致表明,不同浓度NMDA均显着降低海马神经元的活力,诱导了神经元凋亡,红景天苷可抑制NMDA诱导的神经元凋亡,呈现良好的量效关系。2.红景天苷不影响NR2各亚单位的mRNA表达和PSD95蛋白的表达。3.红景天苷预处理可显着抑制NMDA诱导的NO产生和NOS活性增加。4.红景天苷预处理可显着抑制SNP（NO供体）诱导的神经元活力的下降。5.NMDA诱导的细胞凋亡性损伤与p38MAPK磷酸化相关,红景天苷可显着抑制p38MAPK蛋白的磷酸化。结论:红景天苷预处理24h可显着增加NMDA损伤的细胞活力,减少NMDA损伤导致的LDH的释放,且呈明显的剂量相关性,对NMDA损伤的海马神经元有明显的保护作用。其保护作用机制与抑制NMDA诱导的caspase-3活性的升高,NOS活性增加、NO生成和损伤以及p38MAPK蛋白的磷酸化有关。综上研究表明,红景天苷对Glu兴奋性毒性损伤的神经元有明显的保护作用,其保护作用可能与其抑制NMDA受体过度激活介导的兴奋性毒性有关(表现为抑制NMDA受体-Ca2+-NO路径的激活和p38MAPK蛋白的磷酸化),为其用于脑缺血等损伤的研究和应用打下了实验基础。
二、NMDA-Ca~(2+)-NO路径与继发性脑损伤（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、NMDA-Ca~(2+)-NO路径与继发性脑损伤（论文提纲范文）
（1）法舒地尔在脑卒中中神经保护作用的机制探究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 中英文缩略词表 |
| 前言 |
| 第一章 实验材料 |
| 第一节 研究对象 |
| 第二节 主要试剂及耗材 |
| 第三节 主要实验软件 |
| 第四节 主要试剂配制 |
| 第二章 实验方法 |
| 第一节 动物分组及药物处理 |
| 第二节 动物模型制备 |
| 第三节 动物坏死体积的测定 |
| 第四节 MMP9活性的检测 |
| 第五节 EvansBlue渗出量的检测 |
| 第六节 免疫印迹法检测 |
| 第七节 SOD1,SOD2,SOD3mRNA的检测 |
| 第八节 SODs酶活性的检测 |
| 第九节 统计学处理 |
| 第三章 实验结果 |
| 第一节 Fasudil减轻小鼠缺血/再灌注引起的损伤 |
| 第二节 Fasudil降低小鼠缺血/再灌注血液中MMP9的活性 |
| 第三节 Fasudil减轻小鼠缺血/再灌注引起的BBB损伤 |
| 第四节 Fasudil增加PPARα的表达 |
| 第五节 Fasudil提高SOD1,SOD2,SOD3的表达及 SODs 酶的活性 |
| 第四章 讨论 |
| 第一节 Rho/ROCK通道在脑缺血中的影响 |
| 第二节 法舒地尔在脑缺血中的作用 |
| 第三节 维持BBB完整性在脑缺血中起神经保护作用 |
| 第四节 MMP9在脑缺血中的作用 |
| 第五节 ROS在脑损伤中的作用 |
| 第六节 PPARα在脑缺血中的作用 |
| 第七节 传统tPA治疗脑损伤的用 |
| 第五章 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录一 |
（2）白细胞介素-4在创伤性脑损伤后脑白质结构及功能的损伤与修复中的作用（论文提纲范文）
| 英文缩略词表 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 IL-4治疗对TBI损伤后加强脑白质完整性和促进神经系统功能恢复中的作用 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 第二部分 IL-4通过激活PPAγ诱发OPC向成熟OLs分化并促进再髓鞘化 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表论文情况 |
| 致谢 |
（3）载脂蛋白E对星形胶质细胞NF-κB信号通路及MMP-9作用机制研究（论文提纲范文）
| 个人简历 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 研究背景 |
| 第一部分 阐述p65与MMP-9是否参与EAE的疾病进展 |
| 1.1 研究材料 |
| 1.2 研究方法 |
| 1.3 研究结果 |
| 1.4 讨论 |
| 第二部分 阐述ApoE在星形胶质细胞中调控MMP-9机制研究 |
| 2.1 研究材料 |
| 2.2 研究方法 |
| 2.3 研究结果 |
| 2.4 讨论 |
| 第三部分 利用生物信息学探索TNF-α影响星形胶质细胞差异基因和关键通路 |
| 3.1 分析对象 |
| 3.2 分析方法 |
| 3.3 分析结果 |
| 3.4 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 综述参考文献 |
| 中英文缩略词表 |
| 致谢 |
| 攻读硕士研究生期间的研究成果 |
（4）大气污染物NO2暴露诱导认知功能损伤及其分子机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 二氧化氮(NO_2)污染现状及中枢神经系统(CNS)损伤 |
| 1.1.1 NO_2污染现状 |
| 1.1.2 NO_2污染与CNS疾病 |
| 1.1.3 CNS损伤常见机制 |
| 1.2 NO_2污染与神经退行性疾病 |
| 1.2.1 NO_2污染与阿尔兹海默症(AD) |
| 1.2.2 AD的病理假说 |
| 1.3 NO_2污染与神经发育疾病 |
| 1.3.1 NO_2的神经发育毒性研究 |
| 1.3.2 长链非编码RNA(lncRNA)与神经发育障碍 |
| 1.4 课题的提出及意义 |
| 第二章 NO_2吸入暴露诱导脑组织线粒体氧化损伤 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 材料和方法 |
| 2.2.1 实验动物及处理方法 |
| 2.2.2 实时荧光定量PCR分析(qRT-PCR) |
| 2.2.3 蛋白免疫印迹分析(Western-blot) |
| 2.2.4 透射电镜观察 |
| 2.2.5 线粒体功能指标检测 |
| 2.2.6 氧化损伤指标测定 |
| 2.2.7 数据分析 |
| 2.3 结果 |
| 2.3.1 NO_2暴露对ROS及MDA水平的影响 |
| 2.3.2 NO_2暴露对线粒体超微结构的影响 |
| 2.3.3 NO_2暴露对线粒体膜电位的影响 |
| 2.3.4 NO_2暴露对线粒体呼吸功能的影响 |
| 2.3.5 NO_2暴露对线粒体生物合成的影响 |
| 2.4 讨论与结论 |
| 第三章 NO_2吸入暴露诱导类阿尔兹海默症的发生及作用机制 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.2.1 实验动物及研究方案 |
| 3.2.2 Morris水迷宫检测 |
| 3.2.3 Western-blot分析 |
| 3.2.4 免疫组织化学和组织化学 |
| 3.2.5 液相色谱-串联质谱法检测(LC-MS/MS) |
| 3.2.6 EIA测定PGE2含量 |
| 3.2.7 基因芯片分析 |
| 3.2.8 数据分析 |
| 3.3 结果 |
| 3.3.1 NO_2暴露对C57小鼠空间学习记忆能力和Aβ生成的影响 |
| 3.3.2 NO_2暴露对AD模型鼠空间学习记忆能力和Aβ沉积的影响 |
| 3.3.3 NO_2暴露对AD模型鼠神经炎性和神经元退行性的影响 |
| 3.3.4 COX-2介导AA代谢异常参与NO_2诱导的类AD型病理损伤发生 |
| 3.3.5 抑制MAGL活性可逆转NO_2暴露所致类AD型病理损伤 |
| 3.4 讨论与结论 |
| 第四章 NO_2吸入暴露诱导Tau蛋白高度磷酸化及胰岛素信号传导路径异常 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 材料和方法 |
| 4.2.1 实验动物及处理 |
| 4.2.2 Western-blot分析 |
| 4.2.3 免疫组织化学检测 |
| 4.2.4 透射电镜观察 |
| 4.2.5 酶联免疫(ELISA)检测血清胰岛素水平 |
| 4.2.6 数据分析 |
| 4.3 结果 |
| 4.3.1 NO_2暴露对tau蛋白磷酸化的影响 |
| 4.3.2 NO_2暴露对突触传递相关蛋白表达的影响 |
| 4.3.3 NO_2暴露对脑胰岛素信号传导的影响 |
| 4.3.4 NO_2暴露导致系统性胰岛素抵抗并诱导高胰岛素血症的发生 |
| 4.3.5 NO_2暴露激活JNK或p38MAPK引发胰岛素抵抗 |
| 4.4 讨论与结论 |
| 第五章 基于lncRNA的转录调控研究孕期NO_2吸入暴露诱导子代性别差异性神经发育损伤机制 |
| 5.1 前言 |
| 5.2 材料和方法 |
| 5.2.1 实验动物及处理方法 |
| 5.2.2 Morris水迷宫检测 |
| 5.2.3 转录组测序及差异基因功能分析 |
| 5.2.4 QRT-PCR分析 |
| 5.2.5 染色质免疫共沉淀(ChIP) |
| 5.2.6 RNA结合蛋白免疫沉淀(RIP) |
| 5.2.7 Western-blot检测 |
| 5.2.8 组织病理学检测 |
| 5.2.9 数据分析 |
| 5.3 结果 |
| 5.3.1 母体孕期NO_2暴露对子鼠生长发育的影响 |
| 5.3.2 母体孕期NO_2暴露对子鼠空间学习记忆能力的影响 |
| 5.3.3 母体孕期NO_2暴露对子鼠发育过程脑皮层mRNA表达的影响 |
| 5.3.4 母体孕期NO_2暴露对断乳期子鼠脑皮层lncRNA表达的影响 |
| 5.3.5 关键lncRNA Malat1调控雄性子鼠神经功能损伤的机制 |
| 5.4 讨论与结论 |
| 第六章 结论 |
| 6.1 NO_2本体直接暴露导致类AD型神经退行性病理损伤 |
| 6.1.1 线粒体氧化应激是NO_2暴露导致CNS损伤的始发事件 |
| 6.1.2 NO_2吸入暴露靶向AA代谢路径导致类AD型神经退行性病变 |
| 6.1.3 NO_2吸入暴露干扰胰岛素信号传导引起tau蛋白过度磷酸化 |
| 6.2 母体孕期NO_2暴露导致子代lncRNA转录异常引起性别差异性神经发育障碍 |
| 缩略词 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 |
| 主持与参与科研项目 |
| 致谢 |
| 个人简况及联系方式 |
（5）夹脊电针联合MP调控NMDAR/Calpain通路相关蛋白抑制ASCI大鼠微环境神经细胞凋亡作用机制研究（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 文献综述 |
| 1 中医学对本病(痿证)的认识 |
| 1.1 中医学对本病(痿证)病名及病因病机认识 |
| 1.2 中医学对本病(痿证)的治疗 |
| 1.3 夹脊电针治疗急性脊髓损伤研究进展 |
| 2 急性脊髓损伤微环境变化 |
| 2.1 概念 |
| 2.2 急性脊髓损伤细胞微环境的变化 |
| 3 急性脊髓损伤后细胞凋亡研究进展 |
| 3.1 细胞凋亡的概念 |
| 3.2 细胞凋亡的信号转导机制 |
| 3.3 脊髓损伤细胞凋亡的分子机制 |
| 4 NMDA受体信号通路研究进展 |
| 4.1 NMDA受体信号通路概述 |
| 4.2 NMDA受体信号通路各信号分子的结构与作用 |
| 4.3 NMDA受体信号通路抑制剂 |
| 实验部分 |
| 第一部分 急性脊髓损伤(ASCI)大鼠神经细胞凋亡时间点的实验研究 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 统计学分析 |
| 4 实验结果 |
| 第二部分 优化ASCI大鼠治疗方案的实验研究 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 统计学分析 |
| 4 实验结果 |
| 第三部分 夹脊电针联合MP对ASCI大鼠NMDAR/Calpain通路相关因子及细胞凋亡的影响 |
| 实验一 夹脊电针联合MP对ASCI大鼠脊髓组织尼氏染色的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 统计学分析 |
| 4 实验结果 |
| 实验二 夹脊电针联合MP对ASCI大鼠脊髓组织NMDA-NR1、calpain-2、cleaved caspase-3免疫组化表达的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 统计学分析 |
| 4 实验结果 |
| 实验三 夹脊电针联合MP对ASCI大鼠脊髓组织NMDA-NR1、Calpain-2与cleaved caspase-3蛋白表达的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 统计学分析 |
| 4 实验结果 |
| 讨论 |
| 1 ASCI大鼠神经细胞凋亡时间点的确定 |
| 2 钙蛋白酶(calpain)在ASCI大鼠神经细胞凋亡中的作用 |
| 3 优化ASCI大鼠治疗方案的实验研究 |
| 4 夹脊电针联合MP对ASCI大鼠NMDAR/calpain信号通路相关因子及细胞凋亡的影响 |
| 5 不足与展望 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 |
| 个人简介 |
（6）基于ZL006体内代谢研究的抗脑卒中新药发现（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一章 ZL006血浆及保组织浓度测定 |
| 1. 试剂与仪器 |
| 2. 实验动物 |
| 3. 检测条件 |
| 4. 溶液的配制 |
| 5. 血浆、脑组织预处理 |
| 6. 方法学研究 |
| 7. 尾静脉注射试验 |
| 8. 实验结果与分析 |
| 9. 本章小结 |
| 第二章 ZL006甲酯血浆、脑组织分布研究 |
| 1. 试剂与仪器 |
| 2. 实验动物 |
| 3. 检测条件 |
| 4. 溶液的配制 |
| 5. 血浆、脑组织预处理 |
| 6. 方法学研究 |
| 7. 尾静脉注射实验 |
| 8. 实验结果与讨论 |
| 9. 本章小结 |
| 第三章 ZL006乙酯的血浆、脑组织分布研究 |
| 1. 试剂与仪器 |
| 2. 实验动物 |
| 3. 检测条件 |
| 4. 溶液的配制 |
| 5. 血浆、脑组织预处理 |
| 6. 方法学研究 |
| 7. 试验内容 |
| 8. 实验结果与讨论 |
| 9. 本章小结 |
| 第四章 ZL006环己酯的血浆、脑组织分布研究 |
| 1. 试剂与仪器 |
| 2. 实验动物 |
| 3. 检测条件 |
| 4. 溶液的配制 |
| 5. 血浆、脑组织预处理 |
| 6. 方法学研究 |
| 7. 试验内容 |
| 8. 实验结果与讨论 |
| 9. 本章小结 |
| 第五章 ZL006-M1血浆、脑组织分布 |
| 1. 试剂与仪器 |
| 2. 实验动物 |
| 3. 检测条件 |
| 4. 溶液的配制 |
| 5. 血浆、脑组织预处理 |
| 6. 方法学 |
| 7. 尾静脉注射实验 |
| 8. 实验结果与讨论 |
| 9. 本章小结 |
| 第六章 ZL006-M2血浆、脑组织分布 |
| 1. 试剂与仪器 |
| 2. 实验动物 |
| 4. 检测条件 |
| 4. 溶液的配制 |
| 5. 血浆、脑组织预处理 |
| 6. 方法学 |
| 7. 试验内容 |
| 8. 实验结果与讨论 |
| 9. 本章小结 |
| 第七章 ZL006-M3血浆、脑组织分布 |
| 1. 试剂与仪器 |
| 2. 实验动物 |
| 3. 检测条件 |
| 4. 溶液的配制 |
| 5. 血浆、脑组织预处理 |
| 6. 方法学 |
| 7. 试验内容 |
| 8. 实验结果与讨论 |
| 9. 本章小结 |
| 第八章 讨论与总结 |
| 第九章 药效学研究结果 |
| 参考文献 |
| 综述 缺血性脑卒中治疗现状 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（7）健脑益智胶囊对TBI后大鼠学习记忆及海马区CaMKⅡ表达的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一章 研究背景 |
| 一.中医学对颅脑损伤后学习记忆障碍的认识 |
| 1.中医学与颅脑损伤 |
| 2.中医学对学习记忆障碍研究 |
| 二.现代医学对颅脑损伤后学习记忆障碍的认识及治疗概况 |
| 1.颅脑损伤的研究进展 |
| 2.现代医学对学习记忆研究 |
| 3.颅脑损伤后学习记忆功能障碍认识 |
| 第二章 实验研究 |
| 一.材料与方法 |
| 1.材料 |
| 2.实验方法 |
| 二.相应实验时期观察检测海马系列指标 |
| 1.大鼠的神经行为学检测 |
| 2.实验对象的组织病理检测 |
| 3.图像采集与数据分析 |
| 三.实验结果 |
| 1.大鼠TBI造模结果 |
| 2.Morris水迷宫测试结果 |
| 3 大鼠海马组织病理学观察结果 |
| 四.讨论 |
| 1.关于模型动物的选择 |
| 2.大鼠脑创伤模型制作及评价 |
| 3.关于对照药物的选择 |
| 4.大鼠死亡原因分析 |
| 5.健脑益智胶囊对TBI后神经行为学的影响 |
| 6.脑损伤后脑神经元形态的变化及机制探讨 |
| 7.健脑益智胶囊对TBI后脑组织海马组织钙离子／钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKll)蛋白表达的影响 |
| 五.结论 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
（8）静脉麻醉药抑制利多卡因致大鼠惊厥作用的比较（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 研究论文 静脉麻醉药抑制利多卡因致大鼠惊厥作用的比较 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 静脉麻醉药在局麻药惊厥中的作用 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（9）体外循环对神经细胞损伤和神经节苷脂的脑保护作用及机制（论文提纲范文）
| 英文缩略词表 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 实验部分 |
| 第一部分 大鼠CPB 模型的建立 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 4. 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 GM1 对大鼠CPB 脑损伤的保护作用—形态、功能研究 |
| 实验一 GM_1对CPB 后大鼠海马、皮层细胞超微结构的影响 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 4. 小结 |
| 参考文献 |
| 实验二 GM_1对CPB 后大鼠脑组织氧化性应激的影响 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 4. 小结 |
| 参考文献 |
| 实验三 GM)1对CPB 后大鼠脑组织Na~+-K~+-ATPase 活性的影响 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 4. 小结 |
| 参考文献 |
| 实验四 GM_1对CPB 后大鼠脑组织一氧化氮合成酶活性的影响 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 4. 小结 |
| 参考文献 |
| 实验五 GM_1 对CPB 后大鼠海马、皮层炎性细胞因子的影响 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 实验结果 |
| 3. 讨论 |
| 4. 小结 |
| 参考文献 |
| 第三部分 GM_1对CPB 心内直视术老年患者S100B、Tau 蛋白水平及脑氧代谢的影响 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 4. 小结 |
| 参考文献 |
| 全文总结 |
| 创新和意义 |
| CPB 脑损伤及发生机制（综述） |
| 致谢（Acknowledgements） |
| 攻读博士学位期间发表的论文目录 |
（10）红景天苷对神经元损伤的保护作用及机制的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 红景天苷对 Glu 损伤神经元的保护作用及 作用机制的研究 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 海马神经元的培养与鉴定 |
| 2.2 红景天苷对海马神经元活力的影响 |
| 2.3 Glu 对海马神经元活力的影响 |
| 2.4 红景天苷预处理对Glu 损伤海马神经元活力的影响 |
| 2.5 红景天苷预处理对Glu 损伤海马神经元LDH 漏出量的影响 |
| 2.6 红景天苷预处理对Glu 损伤后海马神经元光镜下形态的影响 |
| 2.7 红景天苷预处理对Glu 损伤海马神经元神经元凋亡的影响 |
| 2.8 红景天苷预处理对Glu 损伤海马神经元caspase-3 活性的影响 |
| 2.9 红景天苷预处理对Glu 损伤海马神经元Bax 和Bcl-2 蛋白表达的影响 |
| 2.10 红景天苷预处理对Glu 损伤的海马神经元[Ca2+]i 的影响 |
| 3 讨论 |
| 第二部分 红景天苷对NMDA 损伤神经元的保护作用及作用机制的研究 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 不同浓度NMDA 对海马神经元活力的影响 |
| 2.2 红景天苷对NMDA 损伤的海马神经元活力的影响 |
| 2.3 红景天苷对NMDA 损伤海马神经元培养上清中LDH 活性的影响 |
| 2.4 红景天苷对NMDA 损伤的海马神经元凋亡的影响 |
| 2.5 红景天苷对NMDA 损伤后caspase-3 活性的影响 |
| 2.6 红景天苷对INMDA 的影响 |
| 2.7 红景天苷对NMDA 受体NR2A、NR28、NR2C 和NR2DmRNA 表达的影响 |
| 2.8 红景天苷对PSD95 蛋白表达的影响 |
| 2.9 红景天苷预处理24h 对NMDA 损伤的海马神经元NO 生成的影响 |
| 2.10 红景天苷预处理24h 对NMDA 损伤的海马神经元NOS 活性的影响 |
| 2.11 红景天苷预处理对SNP 损伤的海马神经元活力的影响 |
| 2.12 红景天苷预处理对NMDA 损伤的p38 MAPK 表达的影响 |
| 3 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 博士期间已发表和待发表的论文 |
| 英文缩略词表 |
| 致谢 |
四、NMDA-Ca~(2+)-NO路径与继发性脑损伤（论文参考文献）
- [1]法舒地尔在脑卒中中神经保护作用的机制探究[D]. 杨锡彤. 大理大学, 2019(01)
- [2]白细胞介素-4在创伤性脑损伤后脑白质结构及功能的损伤与修复中的作用[D]. 郑玄. 中国人民解放军医学院, 2019(02)
- [3]载脂蛋白E对星形胶质细胞NF-κB信号通路及MMP-9作用机制研究[D]. 黄帆. 广西医科大学, 2019(08)
- [4]大气污染物NO2暴露诱导认知功能损伤及其分子机制研究[D]. 闫微. 山西大学, 2018(04)
- [5]夹脊电针联合MP调控NMDAR/Calpain通路相关蛋白抑制ASCI大鼠微环境神经细胞凋亡作用机制研究[D]. 綦雪巍. 黑龙江中医药大学, 2016(08)
- [6]基于ZL006体内代谢研究的抗脑卒中新药发现[D]. 赵婷. 南京医科大学, 2016(06)
- [7]健脑益智胶囊对TBI后大鼠学习记忆及海马区CaMKⅡ表达的影响[D]. 张艳婷. 陕西中医药大学, 2016(10)
- [8]静脉麻醉药抑制利多卡因致大鼠惊厥作用的比较[D]. 王春平. 河北医科大学, 2010(04)
- [9]体外循环对神经细胞损伤和神经节苷脂的脑保护作用及机制[D]. 秦科. 广西医科大学, 2009(09)
- [10]红景天苷对神经元损伤的保护作用及机制的研究[D]. 陈霞. 苏州大学, 2009(06)