一、滋阴降火中药合剂治疗真性儿童性早熟作用的神经生物学机制的研究（论文文献综述）
尹蔚萍[1]（2021）在《基于“肝肾同源”辨治女童性早熟经验总结及疏肝泻火方治疗CPP的机制研究》文中研究说明目的:1.总结导师基于“肝肾同源”论治女童性早熟的临床经验和用药规律;2.探讨疏肝泻火方治疗CPP的作用机制。立足于垂体GnRH受体信号转导系统,围绕GnRH受体后PKC-MAPK信号通路以及雌激素反馈机制,运用病理学和RT-qPCR、Western Blot、ELISA、免疫组化等技术,从体内到体外细胞实验,探讨疏肝泻火方对垂体的调节作用,揭示其对垂体GTH分泌及雌激素反馈调节的影响,进一步阐明该方对HPG轴的调控机制。方法:1.经验总结:通过门诊跟师、老师指导等方式,运用数据分析技术,总结导师治疗女童性早熟的临床经验和用药规律。2.动物实验:将大鼠分为正常发育组、模型组、亮丙瑞林组和疏肝泻火方（SXF）高、中、低剂量组。通过皮下注射N-甲基-DL-天冬氨酸构建CPP模型,皮下注射亮丙瑞林作为阳性对照,分别给予高、中和低剂量的疏肝泻火方灌胃干预。在CPP组大鼠出现第一个动情前期时,将大鼠处死,其余各组按1:1比例同时处死。收集下丘脑、垂体、卵巢、子宫组织和外周血,对大鼠体重和性器官的重量进行测定,对卵泡成熟度、子宫壁厚度进行切片观察。通过ELISA检测外周血中FSH、LH、PRL、E2的表达水平。通过RT-qPCR和Western Blot检测垂体组织中GnRH、GnRHR、ERα、GPR30 mRNA和蛋白的表达水平。采用免疫组化法检测对下丘脑中GnRH和卵巢中GnRHR的表达进行检测。3.细胞实验:在细胞实验中,通过CCK-8法计算细胞活力,首先分析了瘦素（leptin,LEP）对垂体细胞的影响,确定阳性药组亮丙瑞林（Leuprorelin,LP）体外处理垂体细胞的最佳药物干预浓度。为探讨SXF对LEP诱导的垂体细胞的影响,大鼠垂体细胞,分组1:LEP组、LEP+LP组（模型+亮丙瑞林阳性药干预组）和LEP+SXF组（模型+含有SXF药物血清干预组）。为研究SXF通过PKC-MAPK通路对LEP处理的垂体细胞的影响,分组2:LEP组、LEP+SXF组（模型+含有SXF药物血清干预组）、LEP+SXF+HY-N2180组（模型+含有SXF药物血清干预+PKC激活剂组）。通过ELISA法检测培养基中FSH、LH的水平。通过RT-qPCR和Western Blot检测垂体细胞中GnRHR、ERα、GPR30 mRNA和蛋白的表达水平。通过Western Blot检测垂体组织PKC-MAPK通路中关键信号传导分子PKC、p38 MAPK、EPK和JNK的蛋白表达水平。结果:1.熊磊教授基于“肝肾同源”理论治疗女童性早熟,提出“从肝论治、整体调治、分期辨治”的治疗理念,而疏肝泻火方是辨治女童性早熟的有效方剂。2.动物实验:相对于正常发育组,模型组大鼠的双侧卵巢、子宫明显变大,成熟卵泡变多,子宫壁增厚;而SXF各组和阳性药组可以抑制性器官的发育。模型组血清FSH、LH、PRL、E2的表达水平、下丘脑中GnRH蛋白表达水平、垂体中GnRH、GnRHR、ERα和GPR30mRNA和蛋白表达水平以及卵巢中GnRHR蛋白表达水平也明显升高,与模型组相比,亮丙瑞林组和SXF高、中、低剂量组的大鼠上述指标均得到缓解,其中CPP-HD-SXF组和CPP-LP缓解最显着。同时提示疏肝泻火方的上述作用存在剂量依赖性趋势。3.细胞实验:对于分组1,LEP组的FSH、LH的分泌水平,GnRHR、ERα和GPR30 mRNA和蛋白表达水平、PKC、p38MAPK、EPK和JNK中转录和蛋白表达水平均显着高于LEP+LP组和LEP+SXF组,并且LEP+LP组和LEP+SXF组的上述指标均显着低于LEP组。对于分组2,LEP+SXF组的PKC、p38 MAPK、EPK和JNK蛋白表达水平和培养基中FSH、LH的表达水平均显着低于LEP组,而LEP+SXF+HY-N2180组的上述指标均显着高于LEP+SXF组。同时,结果表明,HY-N2180可部分逆转SXF对垂体细胞PKC-MAPK通路的抑制作用,SXF通过抑制PKC-MAPK通路缓解LEP干预的垂体细胞分泌FSH、LH。结论:1.疏肝泻火方是基于“肝肾同源”理论辨治女童性早熟的有效方剂,核心药物:柴胡、茯苓、白芍、夏枯草、当归、女贞子、旱莲草、薄荷,体现了从肝论治、整体调治的特点;临证导师擅长使用云南地方药物进行加减,体现了因地制宜的特点。2.疏肝泻火方可能通过抑制下丘脑中的GnRH、垂体中的GnRHR表达,调节雌激素受体ERα和GPR30的表达,从而抑制雌激素和FSH、LH的分泌,达到抑制性器官的发育和HPG轴的激活。3.疏肝泻火方可能通过抑制垂体细胞中的PKC-MAPK信号通路,降低雌激素受体和促性腺激素的表达,进而缓解CPP。
王蔚华[2]（2016）在《滋阴清肝方对雌性中枢性性早熟大鼠褪黑素及受体的影响》文中研究指明目的:从中医基础理论和现代医学角度分析并总结中枢性性早熟的病因病机、治则治法。本文建立雌性大鼠中枢性性早熟（central precocious puberty,CPP）模型,通过观察滋阴清肝方对雌性CPP大鼠性发育、褪黑素及受体、体质量等相关指标的影响,探讨褪黑素及其受体与性早熟之间的关系;了解褪黑素和受体表达及体质量在滋阴清肝方治疗性早熟中的作用,进一步明确滋阴清肝方的作用机制。方法:1理论研究系统回顾古今文献,了解中西医理论对CPP的病因病机、治则治法的认识,为实验研究提供理论依据。2实验研究SD雌性大鼠共32只,出生后随机分为正常组、模型组、西药组、中药组,每组8只。大鼠5日龄时,除正常组外,其余3组大鼠皮下注射300μg达那唑建立大鼠CPP模型。15日龄时,西药组、中药组大鼠分别给予亮丙瑞林（100μg/kg）和滋阴清肝方（3.2g/ml）进行干预。当模型组阴门开启动物超过半数（>50%）时终止实验。自造模之日（5日龄）起,每日通过肉眼观察各组大鼠阴门开启情况并记录开启时的日龄（vaginal opening,VO）;阴道涂片法观察第1个发情间期的出现并记录出现时的日龄（first diestrus,D1）;每4天监测各组大鼠体质量。实验结束时麻醉后处死大鼠,取卵巢、子宫称重计算脏器系数;制作常规组织病理切片观察子宫、卵巢的组织形态并计算子宫壁厚度和卵巢黄体个数;检测血清中的褪黑素（MT）、促黄体生成素（LH）和骨钙素（bgp）水平;通过荧光实时定量pcr法检测下丘脑促性腺激素释放激素（gnrh）mrna的表达;检测下丘脑褪黑素受体mt1、mt2mrna的表达。统计学处理:采用spss18.0统计软件进行统计学分析,组间数据采用单因素方差分析,所有数据均以均数±标准差（x±s）表示,以p<0.05为差异有统计学意义。结果:1、理论研究回顾古今研究cpp的相关文献,对cpp的病因病机、治则治法的认识均认为肝脾肾为发病的关键。现代中医认为性早熟的病机主要有阴虚火旺、肝郁化火、脾虚痰结型3个常见证型。而在长江以南地区,性早熟的证型以阴虚火旺合并肝郁化火多见。滋阴清肝方由知母,黄柏,夏枯草,白芍,生地,丹皮组成,是总结导师向楠教授及专科10余年治疗icpp经验的基础方。在临床观察和动物实验中都已初步证实,滋阴清肝方对cpp有较好的治疗效果。2、实验研究（1）与正常组比较,模型组大鼠31日龄阴门开启日龄明显提前、子宫系数增加（p<0.05）,卵巢系数明显增加（p<0.01）,子宫壁厚度、卵巢黄体数均增加（p<0.05,p<0.01）,血清lh,bgp明显上升（p<0.01）,下丘脑gnrhmrna表达水平升高（p<0.01）,病理切片上可见子宫卵巢组织体积增大,夜间血清mt降低（p<0.01）,下丘脑mt受体mt1mrna的表达上升（p<0.01）。（2）与模型组比较,中药组大鼠的阴门开启日龄延迟,子宫系数降低（p<0.05）,卵巢系数降低（p<0.01）,子宫壁厚度和黄体生成数降低（p<0.05,p<0.01）,lh和bgp降低（p<0.05）,夜间血清mt升高（p<0.05）,并且下丘脑gnrhmrna表达水平下降（p<0.05）,下丘脑mt受体mt1mrna的表达上升（p<0.05）,病理切片上可见子宫卵巢组织体积缩小。（3）与正常组、模型组、西药组比较,中药组组大鼠自25日龄（滋阴清肝方灌胃10日后）至实验结束,体质量明显降低（P<0.05）。结论:（1）在中医基础理论指导下,应用滋阴清肝方治疗CPP既有理论基础,也有实验研究支持。（2）造模后大鼠出现性发育提前,性腺组织增大,性激素水平升高,骨发育亢进,GnRHmRNA表达水平升高的特点;同时夜间血清MT降低,下丘脑MT受体MT1 mRNA的表达下降。提示雌性CPP大鼠造模成功,MT及其受体与性早熟密切相关。（3）滋阴清肝方对雌性CPP大鼠具有明确的治疗作用,可使性发育减缓,性腺组织减小,性激素水平下降,骨发育趋缓,同时夜间血清MT升高,下丘脑MT受体MT1 mRNA的表达上升。滋阴清肝方可能通过升高夜间血清MT,上调下丘脑MT1 mRNA的表达,从而抑制GnRH的释放,延缓HPGA的启动,达到治疗CPP的目的。（4）滋阴清肝方对雌性CPP大鼠的体质量有降低作用,可能与治疗CPP相关。
李婧[3]（2012）在《雌性性早熟大鼠下丘脑GABAA受体α亚基的表达及滋阴泻火中药合剂对其表达的影响》文中研究说明目的：观察GABAA受体α亚基在性早熟模型大鼠下丘脑中的表达规律,并初步探讨GABAA受体α亚基在性早熟发病机制的作用；通过观察滋阴泻火中药合剂对性早熟大鼠下丘脑GABAA受体α亚基表达的影响,探讨滋阴泻火中药合剂的作用机制,为该药治疗性早熟提供新的科学实验依据。方法：实验共分为两部分,我们首先观察了达那唑诱导的性早熟大鼠下丘脑GABAA受体α1-3亚基mRNA的表达。将雌性SD大鼠随机分为正常组,对照组和模型组。模型组大鼠在出生后第5天给与皮下注射达那唑300μg（溶于250μ1乙醇乙二醇等体积溶液）；对照组则注射等体积的乙醇乙二醇混合液；正常组不作任何处理。在前一部分的基础上,我们观察了滋阴泻火中药合剂对性早熟大鼠下丘脑GABAA受体α亚基表达的影响：5日龄雌性SD大鼠分为正常组,模型组,生理盐水组,滋阴泻火中药合剂组（以下简称“中药组”）。后三组在出生后第5天皮下注射达那唑进行造模,正常组不作任何处理；从第15天开始中药组给予滋阴泻火中药合剂灌胃,生理盐水组给予等量生理盐水灌胃,模型组不作其他处理。滋阴泻火中药合剂每毫升含3.3克生药,每天灌胃量为1.29ml/100g体重,至取材时为止。各组实验动物均于生后22天开始观察阴门开启情况；记录每只动物阴门开启的时间。取材时断头处死,迅速取下丘脑-80℃保存,取子宫和卵巢称重,计算子宫和卵巢系数；取血检测雌激素、促性腺激素水平,应用RT-PCR和realtimePCR以及Western Blot观察下丘脑GnRH、GABAA受体α亚基、雌激素α受体以及谷氨酸脱羧酶mRNA的表达变化。结果：实验一1.模型组大鼠阴门开启时间显着早于正常组和对照组（P<0.01）,在出生后25天模型组大鼠子宫和卵巢的发育比正常组和对照组显着提前（P<0.05）；但在生后32天和44天,三组之间子宫和卵巢的器官系数无显着差异。2.模型组大鼠下丘脑GABAA受体α1和α3亚基mRNA表达水平显着下调,与正常组和对照组相比,有显着差异（P<0.05）,而三组动物下丘脑GABAA受体α2亚基mnRNA的表达则无显着差异（P>0.05）。实验二1.生后第22天,模型组大鼠子宫和卵巢的器官系数显着高于正常组（P<0.05）,而中药组大鼠子宫和卵巢的器官系数显着低于模型组（P<0.05）；模型组和生理盐水组大鼠子宫和卵巢的器官系数无显着差异（P>0.05）。2.模型组大鼠血清E2, LH和FSH水平明显高于正常组和对照组（P<0.01）,中药组三种激素水平比模型组和生理盐水组有下降,FSH水平有差异（P<0.05）,E2和LH水平差异尤为明显（P<0.01）。3.模型组性早熟大鼠下丘脑GnRH mRNA的表达显着上调,与正常组相比有显着差异（P<0.01）；中药组大鼠下丘脑GnRH mRNA表达水平显着下降,与模型组相比有显着差异（P<0.01）。4.模型组大鼠下丘脑GABAA受体α1和α3mRNA表达水平显着下调,与正常组相比有显着差异（P<0.01）；中药组大鼠下丘脑GABAA受体α1l和α3mRNA表达水平显着升高,与模型组相比,有显着差异（P<0.01）。而其他四个亚基mRNA的表达在各组之间没有差异（P>0.05）。模型组大鼠下丘脑GABAA受体α1亚基蛋白表达下降,与正常组相比有显着差异（P<0.01）；中药组大鼠下丘脑GABAA受体α1蛋白表达水平显着升高,与模型组相比有显着差异（P<0.01）。与此相似,模型组大鼠下丘脑GABAA受体α3亚基蛋白表达下降,与正常组相比有显着差异（P<0.01）；中药组大鼠下丘脑GABAA受体03蛋白表达水平显着升高,与模型组相比有显着差异（P<0.01）。5.模型组性早熟大鼠下丘脑ERα mRNA水平显着升高,与正常组相比有显着差异（P<0.05）；中药组ERα mRNA表达水平显着降低,与模型组相比,有显着差异（P<0.05）。6.下丘脑GAD65和GAD67mRNA的表达在各组之间无统计学差异（P>0.05）。结论：滋阴泻火中药合剂可以显着缓解雌性性早熟大鼠的性早熟症状；性早熟大鼠下丘脑GnRH mRNA表达显着升高,滋阴泻火中药合剂可以显着下调GnRH mRNA的表达；性早熟大鼠下丘脑ERα受体mRNA表达显着升高,滋阴泻火中药合剂可以显着下调ERα受体mRNA的表达；性早熟大鼠下丘脑GABAA受体α1和α3mRNA和蛋白表达水平显着降低,滋阴泻火中药合剂可以上调GABAA受体α1和α3亚基mRNA和蛋白的表达,进而抑制GnRH的合成释放,延缓性早熟大鼠下丘脑-垂体-性腺轴的启动。
郝海燕[4]（2008）在《化痰泻火养阴法治疗女童特发性性早熟的临床研究》文中研究表明目的:观察抗早颗粒治疗女童特发性性早熟的临床疗效,探讨其作用机制,评价中药治疗本病的临床经济学意义,丰富中医治疗学内容。方法:收集江苏省中医院儿科门诊病例60例（2005年11月～2007年11月）,分成治疗组与对照组,各30例,分别予抗早颗粒和达菲林治疗。进行总疗效及各项观察指标治疗前后的组间、组内比较。结果:抗早颗粒治疗组总疗效为80.00%。治疗后患儿的第二性征逐渐消退,五心烦热、便秘、面赤口渴、盗汗、舌质红与治疗前相比,有极显着差异。其中便秘、面赤口渴、盗汗、舌质红与对照组比较,也有极显着差异,且在治疗3个月即体现其优势。此外,总疗效与对照组比较无显着性差异。实验室指标如血清促黄体生成素、促卵泡生长素,雌二醇均明显下降,子宫、卵巢回缩,与治疗前相比,均为P＜0.01,骨龄增长减缓。这些指标的改善程度与对照组比较无明显差异。从费用—效果分析,抗早颗粒的治疗费用较低,具有较好的临床经济学意义。结论:特发性性早熟存在痰热互结、肾阴亏虚的病理机制;化痰泻火养阴法是治疗特发性性早熟的有效法则;中药治疗本病有较好的临床经济学意义。
孙妍[5]（2007）在《雌性性早熟大鼠脑内Kiss-1/GPR54的表达及滋阴泻火中药合剂对其表达的影响》文中认为目的：本文以达那唑诱导的雌性性早熟大鼠为模型，通过观察脑内调控青春期发育的关键分子——Kiss-1基因衍生肽kisspeptin及其受体GPR54（G-proteincoupled receptor 54）在青春期发育进程中的表达规律，探讨kisspeptin／GPR54在性早熟发病中的作用；观察滋阴泻火中药合剂对kisspeptin／GPR54表达的影响以及kisspeptin／GPR54在滋阴泻火中药合剂治疗性早熟中的作用，进一步认识滋阴泻火中药合剂的作用机制。方法：（1）出生后3天的SD雌性大鼠，随母鼠共同饲养，随机分为正常组（Normal）、载体组（Vehicle）和模型组（Model）。模型组大鼠在出生后5日龄给予皮下注射300μg达那唑。采用免疫组织化学、Westernblot、逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）分别观察青春期启动前（出生后20日龄）、青春期启动（阴门开启为标志）、青春期启动后（建立2个规则的性周期）大鼠脑内Kiss-1／GPR54 mRNA及蛋白的表达规律。（2）采用免疫荧光双标技术观察GPR54和GnRH的共存情况，并运用侧脑室微量注射GPR54抗体中和法，观察性早熟模型大鼠在青春期启动前给予不同剂量GPR54抗体（1：50、1：100、1：200）后，阴门开启时间的变化及免疫组织化学法检测脑内kisspeptin及内侧隔核（rostral medial septum，MS）、Broca斜角带核（Broca diagonal band nucleus，DBB）和内侧视前区（medial preoptic nucleus，MPOA）促性腺激素释放激素（gonadotropin releasing hormone，GnRH）的表达变化，进一步探讨kisspeptin／GPR54在大鼠性早熟发病过程中的作用。（3）采用免疫组织化学、逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）方法，观察喂饲滋阴泻火中药合剂后，性早熟模型大鼠脑内Kiss-1、GPR54、GnRH mRNA及蛋白的表达变化，探讨滋阴泻火中药合剂对Kiss-1／GPR54表达的影响及kisspeptin／GPR54在滋阴泻火中药合剂治疗性早熟中的作用；并观察预先喂饲性早熟模型大鼠（出生后14日龄）滋阴泻火中药合剂（3ml／次、1次／日、喂药7天）后，在青春期启动前（出生后20日龄）运用药理学方法侧脑室1次性微量注射kisspeptin多肽2nmol、4nmol的方法，观察大鼠阴门开启时间的变化及脑内GPR54和GnRH蛋白的表达变化，进一步探讨滋阴泻火中药合剂治疗性早熟的机制。结果：（1）5日龄雌性大鼠皮下注射达那唑后，阴门开启和建立两个规则的性周期时间明显提前，卵巢和子宫的脏器系数较正常组大鼠明显增加，青春期启动时下丘脑GnRH mRNA和蛋白表达水平较正常组显着升高。性早熟模型大鼠青春期启动前未见下丘脑特异性kisspeptin／GPR54阳性细胞表达，青春期启动时室周核（periventricular nucleus，PeN）、弓状核（arcuate nucleus，ARC）、视前区（preoptic area，POA）kisspeptin／GPR54免疫阳性细胞呈特异性表达。ARC、PeN的kisspeptin免疫阳性细胞数在青春期启动后表达减少，POA的kisspeptin细胞数在青春期启动后表达增加；ARC、PeN的GPR54免疫阳性细胞数在青春期启动后表达增加，POA的GPR54免疫阳性细胞数在青春期启动后表达减少。性早熟模型大鼠在青春期发育进程中，均观察到下丘脑组织Kiss-1／GPR54 mRNA的表达；青春期启动时Kiss-1／GPR54 mRNA表达水平达峰值并明显高于正常大鼠，青春期启动后其表达水平有所下降。（2）免疫荧光双标技术显示GPR54和GnRH在性早熟大鼠POA存在共存现象。青春期启动前侧脑室给予1：50、1：100 GPR54抗体的性早熟大鼠，阴门开启时间较模型组明显延迟，kisspeptin免疫阳性细胞表达未见明显变化，MS、DBB和MPOA的GnRH免疫阳性细胞数却明显增加。（3）免疫组织化学及RT-PCR技术观察到滋阴泻火中药合剂可下调性早熟模型大鼠下丘脑Kiss-1、GPR54及GnRH mRNA的表达，抑制ARC、PeN和POA的kisspeptin和GPR54蛋白的释放，诱导MS、DBB和MPOA的GnRH免疫阳性细胞数增加。（4）性早熟模型大鼠喂饲滋阴泻火中药合剂后在20日龄时侧脑室微量注射kisspeptin多肽2nmol、4nmol，22日龄时均出现阴门开启。结论：（1）性早熟大鼠青春期启动时ARC、PeN和POA的kisspeptin／GPR54的表达异常，下丘脑Kiss-1／GPR54 mRNA的表达水平增高，可能参与促进大鼠青春期提前启动，导致大鼠性早熟的发生。（2）侧脑室注射GPR54抗体可能抑制性早熟大鼠GnRH的表达，使性早熟大鼠的性发育延迟，kisspeptin可能直接通过其受体GPR54介导性早熟大鼠青春期的提前启动。（3）滋阴泻火中药合剂可通过下调下丘脑Kiss-1／GPR54 mRNA及蛋白的表达，抑制GnRH的释放，延缓性早熟大鼠下丘脑-垂体-性腺轴（hypothalamic-pituitary-gonad axis，HPGA）的启动。
曹守凤[6]（2005）在《儿科Ⅱ号合剂对真性性早熟大鼠骨生长影响的实验研究》文中进行了进一步梳理目的:观察滋阴泻火中药-儿科Ⅱ号?合剂对雌性大鼠真性性早熟的发生以及对真性性早熟大鼠成骨细胞功能的影响,探讨其对下丘脑-垂体-生长轴功能的影响及治疗真性性早熟的机理。方法:26日龄同窝雌性SD大鼠50只,随机分为五组。正常对照组:用生理盐水灌胃及皮下注射;性早熟模型组:用N-甲基-DL-天冬氨酸（NMA 40mg/kg）皮下注射建立性早熟模型并分作四组:性早熟对照组,以生理盐水灌胃;甲地孕酮干预组,甲地孕酮（0.3mg/kg）灌胃;中药高剂量组,儿科Ⅱ号合剂（20ml/kg）灌胃;中药低剂量组,儿科Ⅱ号合剂（12ml/kg）灌胃。每天观察大鼠的阴道口开放情况,正常对照组和性早熟对照组阴道口开放后,每日行阴道涂片,观察其性周期的变化,至第一个发情前期处死。其余各组在阴道口开放时停用NMA,并与性早熟对照组同时处死。处死时取血测定LH、BGP水平,取下丘脑测定下丘脑GnRH mRNA含量,取子宫、卵巢,计算子宫指数和卵巢指数,观察卵巢组织切片黄体的出现;截取包括骨骺软骨在内的一段后肢骨关节,测定骨骺生长板BGPmRNA含量。结果:1)性早熟对照组大鼠阴道口开放和第一个发情间期出现的时间较正常对照组提前（P < 0.05）,性早熟对照组出现了规则的性周期,其子宫指数、卵巢指数、卵巢黄体出现率、下丘脑GnRH mRNA含量和血LH水平与正常对照组之间比较差异均无显着性（P>0.05）;2)甲地孕酮干预组、中药高剂量组与中药低剂量组的子宫指数、卵巢指数、卵巢黄体出现率、下丘脑GnRH mRNA含量和血LH水平均小于或低于性早熟对照组（P<0.05）,三组之间两两比较差异无显着性（P>0.05）;3)中药高剂量组、中药低剂量组大鼠血中BGP水平及骨骺生长板BGPmRNA表达水平均明显低于正常对照组和性早熟对照组（P<0.01）,两组之间差异无显着性（P>0.05）,而甲地孕酮干预组血中BGP水平及骨骺生长板BGPmRNA表达水平与正常对照组和性早熟对照组相比差异无显着性（P>0.05）。结论:1) NMA诱发的雌性大鼠性早熟模型是真性性早熟;2)滋阴降火方——儿科Ⅱ?号合剂可以抑制NMA诱发雌性大鼠性早熟的发生,其作用和甲地孕酮无显着性差异; 3)儿科Ⅱ号?合剂对成骨细胞的功能有抑制作用,无明显的量效关系;4)甲地孕酮对成骨细胞的功能无明显抑制作用。
蔡德培[7]（2004）在《补肾中药调整性早熟儿童青春发育进程的作用及其机理研究》文中研究表明 我院近十余年来对儿童真性特发性性早熟的发病规律、诊断及治疗进行了系统的研究,制定了一套调整其青春发育进程的中药治疗方案,包括在起病时诱导其缓解,缓解后巩固并维持疗效,到达正常青春期年龄时,则促使其更好地青春发育。本研究采用随机、对照、单盲的设计方案,根据治疗前后临床疗效及实验室指标变化的自身对比及各组间的相互对比。验证该套治疗方案的疗效;在临床取得疗效的基础上,进一步从神经内分泌调节及基因表达的角度研究所用中药调整患儿青春发育进程的作用机理。
刘艳[8]（2004）在《儿科Ⅱ号合剂干预大鼠真性性早熟发生的实验研究》文中研究表明目的:观察滋阴泻火中药-儿科II号合剂对雌性大鼠真性性早熟的发生和下丘脑-垂体-性腺轴功能影响,探讨其治疗真性性早熟的机理。方法:26日龄同窝雌性SD大鼠50只,随机分为五组。正常对照组:用生理盐水灌胃及皮下注射;NMA组:用N-甲基-DL-天冬氨酸（NMA 40mg/kg）皮下注射建立性早熟模型;甲地孕酮组:NMA皮下注射,甲地孕酮（0.3mg/kg）灌胃;中药高剂量组:NMA皮下注射,儿科II号合剂（20ml/kg）灌胃;中药低剂量组:NMA皮下注射,儿科II号合剂（12ml/kg）灌胃。每日观察各组大鼠的阴道口开放情况。正常组及NMA组阴道口开放后,每日行阴道涂片,观察其性周期的变化,至第一个发情前期处死。各实验组在NMA组阴道口开放时停用NMA,并与NMA组同时处死。处死时取血测定LH水平,取下丘脑测定下丘脑GnRH mRNA含量,取子宫、卵巢,计算卵巢指数和子宫指数,测量子宫壁厚度,观察卵巢组织切片黄体的出现。结果:1) NMA组大鼠阴道口开放和第一个发情间期出现的时间较正常对照组提前（P < 0.05）,NMA组出现了规则的性周期并且其卵巢指数、子宫指数、卵巢黄体出现率、子宫壁厚度、下丘脑GnRH mRNA表达水平和血LH水平与正常对照组之间比较差异均无显着性;2) 中药高剂量组与低剂量组的卵巢指数、子宫指数、卵巢黄体出现率、子宫壁厚度、下丘脑GnRH mRNA表达水平和血LH水平均小于或低于NMA组（P<0.05）,但中药高、低剂量组两者之间差异无显着性;3) 中药高、低剂量组大鼠的卵巢指数、子宫指数、卵巢黄体出现率、子宫壁厚度、下丘脑GnRH mRNA表达水平和血LH水平与甲地孕酮组大鼠比较差异均无显着性。结论:1) NMA诱发雌性大鼠的性早熟模型是真性性早熟;2) 滋阴降火中药方——儿科II?号合剂可以抑制NMA诱发雌性大鼠性早熟的发生,其作用和甲地孕酮无明显差异; 3) 儿科II?号合剂对下丘脑-垂体-性腺轴有抑制作用; 4) 儿科II?号合剂两种剂量对下丘脑-垂体-性腺轴的抑制作用无明显的量效关系。
田占庄[9]（2003）在《性早熟差异表达基因的克隆和鉴定及滋阴泻火中药合剂对差异基因的影响》文中指出性早熟差异表达基因的克隆和鉴定及滋阴泻火中药合剂对差异基因的影响 性早熟是一种生长发育异常性疾病，男女儿童中本病的发病率约为0.6％。但真性性早熟的病因仍不清楚。本实验应用分子生物学、免疫组织化学等实验方法，在达那唑诱导的性早熟大鼠模型上，克隆和鉴定性早熟大鼠下丘脑差异表达的基因，并初步观察了模型鼠和患儿外周血单个核细胞中差异基因的表达，以探讨性早熟的发病机制和中药治疗性早熟的机理。实验结果如下： 1．5日龄雌性大鼠皮下注射达那唑后，大鼠阴门开启和出现第一个性周期的时间分别为25.97±2.24天和32.43±0.75天，比正常组的34.00±0.98天和41.26±2.35天及载体组的34.33±1.09天和40.00±0.19天均显着提前（P＜0.01）：模型组大鼠出现第一个动情周期时，卵巢和子宫的脏器系数也分别比正常组和载体组的明显增加（P＜0.01）。另外模型组大鼠阴道脱落上皮细胞的形态学周期性变化和正常成熟大鼠的相似。结果提示，达那唑可诱导雌性大鼠的性发育显着提前，该模型是一种较理想的真性性早熟大鼠模型。 2．应用随机引物PCR（RNA arbitrarily primed PCR,RAP-PCR）方法从达那唑诱导的性早熟模型大鼠下丘脑共分离得到5条差异表达基因的cDNA片段，其中包括生殖调控体系的关键分子GnRH的cDNA。本文应用Dot blot鉴定了GnRHmRNA在大鼠下丘脑的表达，发现模型组下丘脑GnRHmRNA的表达呈上调趋势。另外一条差异表达基因，我们将其命名为IPP-1（idiopathic precocious puberty），Blast检索GeneBank发现，其与homo sapiens KIAA1538基因的同源性达84％，应用Dot blot和Northern blot分析发现，IPP-1mRNA在模型组大鼠下丘脑的表达下调。 3．应用RT-PCR方法观察到，滋阴泻火中药合剂可下调下丘脑GnRHmRNA和垂体GnRH受体mRNA的表达。应用免疫组织化学研究发现，滋阴泻火中药合剂可以诱导性早熟模型大鼠下丘脑GnRH免疫阳性细胞数增加，我们推测滋阴泻火中药合剂可能通过抑制下丘脑GnRH的释放，缓解提前启动的下丘脑—垂体—性腺轴（hypothalamic-pituitary-gonad axis, HPGA）功能。另外，滋阴泻火中药合剂可显着上调性早熟差异基因IPP-1的表达。提示滋阴泻火中药合剂可在分子水平通过调整异常的基因表达，使HPGA的异常功能趋于正常化。性旱熟差异表达基因的克隆和鉴定及滋阴泻火中药合剂对差异基因的影响4.应用RT一PCR的方法观察到，在大鼠及不同年龄和性早熟儿章外周血单个核，细胞内均有GnRJlmRNA的表达，模型组大鼠其表达增加，性早熟患儿（，1=2）外周血单个核细胞内GnRHmRNA的表达较正常发育儿童（4岁、6岁、8岁）有升高趋势。我们推测外周组织细胞产生的GnRH可能通过旁分泌作用J几垂体之外的组织细胞上的GnRH受体，调节卵巢卵泡的发育和性街体激素的产生。虽然在外周血单个核细胞内观察到了KIAA1538mRNA的表达，但儿童及大鼠各组之间表达水平无显着差异。 总之，儿童性早熟可能是一种涉及到基因调控和表达的疾病，滋阴泻火中药合剂可从分子水平，在多个层次调整异常的HPGA功能。
陈伯英,庄振杰,蔡德培[10]（2002）在《滋阴降火中药合剂治疗真性儿童性早熟作用的神经生物学机制的研究》文中进行了进一步梳理目的:以青春发动期大鼠作为研究的动物模型,探讨滋阴降火中药合剂（以下简称中药合剂）治疗儿童真性性早熟药理作用的神经生物学机制。方法:动物随机分成雌性给药组、雄性给药组、雌性对照组和雄性对照组。给药组动物每天给中药合剂5ml 灌胃,对照组给生理盐水5ml,共给药25天。用脑核团推挽灌流、GnRH 放射免疫测定、HPLC、脑片孵育和组织免疫化学技术,观察中药合剂对下丘脑 GnRH 的含量及释放,某些兴奋性和抑制性氨基酸递质及β-内啡肽释放的影响。结果:雌性给药组视前区 GnRH 在180min 内观察到1个脉冲释放,与对照组平均每104min 出现1次脉冲释放比较,差异有显着性（P<0.01）;两给药组动物 MPOA 区灌流液中谷氨酸和门冬氨酸的浓度均比相应的对照组下降显着（P<0.05）,γ-氨基丁酸（GABA）的浓度比相应对照组显着升高（雌性 P<0.01,雄性P<0.05）;两给药组 MPOA 区β-内啡肽的释放比对照组均显着增加（P<0.05）;雌性大鼠给药组视前区和隔区 GnRH 免疫阳性物质的积分光密度明显低于对照组（P<0.05）;雌性大鼠脑片体外灌注结果显示,高 KCl 浓度环境中,给药组内侧基底下丘脑（MBH）的GnRH 释放明显低于对照组（P<0.05）。结论:中药合剂可能通过影响下丘脑某些氨基酸递质及β-内啡肽的释放,抑制了青春发动期大鼠的下丘脑 GnRH 合成和释放,从而调整了下丘脑—垂体—性腺轴的功能活动,可能是中药合剂治疗真性性早熟的神经生物学机制。
二、滋阴降火中药合剂治疗真性儿童性早熟作用的神经生物学机制的研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、滋阴降火中药合剂治疗真性儿童性早熟作用的神经生物学机制的研究（论文提纲范文）
（1）基于“肝肾同源”辨治女童性早熟经验总结及疏肝泻火方治疗CPP的机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 文献研究 |
| 1 中医学对性早熟的认识和研究现状 |
| 2 现代医学对CPP的认识和研究现状 |
| 3 性早熟指南或共识发布情况 |
| 4 国家自然科学基金资助性早熟中医药项目情况 |
| 5 讨论 |
| 第二部分 基于“肝肾同源”辨治女童性早熟的用药规律和经验总结 |
| 1 用药规律探讨 |
| 1.1 资料和方法 |
| 1.2 纳入标准和排除标 |
| 1.3 统计方法 |
| 1.4 结果 |
| 1.4.1 高频药物分析 |
| 1.4.2 性味归经分析 |
| 1.4.3 功效归类分析 |
| 1.4.4 药物关联规则分析 |
| 1.4.5 高频中药聚类分析 |
| 2 经验总结 |
| 2.1 基于“肝肾同源”辨治女童性早熟的理论基础 |
| 2.2 临证论治性早熟 |
| 2.2.1 从肝论治,泻子护母 |
| 2.2.2 整体调治,标本兼顾 |
| 2.2.3 分期辨治,彰显中医特色 |
| 2.2.4 因地制宜,就地取材 |
| 2.2.5 注重调摄,医患合作 |
| 2.3 病例举隅 |
| 第三部分 动物实验分析SXF对雌性CPP大鼠的治疗作用 |
| 1 实验目的 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 实验药物 |
| 2.2 主要实验试剂 |
| 2.3 主要实验仪器 |
| 2.4 动物伦理 |
| 2.5 大鼠饲养、分组和处理方法 |
| 2.6 大鼠处死方法和取标本 |
| 2.7 性器官指数的测量 |
| 2.8 HE染色 |
| 2.9 检测方法 |
| 2.10 统计方法 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 SXF对雌性CPP模型大鼠阴道开放的影响 |
| 3.2 SXF可减少雌性CPP模型大鼠卵巢和子宫的体积 |
| 3.3 SXF可减少雌性CPP模型大鼠卵巢/体重之比和子宫/体重之比 |
| 3.4 SXF对雌性CPP模型大鼠卵泡成熟的影响 |
| 3.5 SXF对雌性CPP模型大鼠子宫壁厚度的影响 |
| 3.6 SXF对雌性CPP模型大鼠血FSH、LH、PRL、E_2水平的影响 |
| 3.7 SXF对雌性CPP模型大鼠下丘脑中GnRH蛋白表达水平的影响 |
| 3.8 SXF对雌性CPP模型大鼠卵巢中GnRHR蛋白表达水平的影响 |
| 3.9 SXF对雌性CPP模型大鼠GnRH、GnRHR、ERα和GPR30转录水平的影响 |
| 3.10 SXF对雌性CPP模型大鼠GnRH、GnRHR、ERα和GPR30蛋白表达水平的影响 |
| 第四部分 细胞实验探究SXF通过PKC-MAPK通路缓解CPP的机制 |
| 1 实验目的 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 主要实验材料 |
| 2.2 细胞培养 |
| 2.3 细胞的分组和干预方法 |
| 2.4 含有SXF药物血清的制备方法 |
| 2.5 CCK-8法检测细胞活力 |
| 2.6 检测方法 |
| 2.7 统计方法 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 不同浓度LEP对大鼠垂体细胞活力的影响 |
| 3.2 不同浓度LP对大鼠垂体细胞活力的影响 |
| 3.3 SXF对LEP干预的垂体细胞中FSH、LH分泌水平的影响 |
| 3.4 SXF对LEP干预的垂体细胞中GnRHR和雌激素受体转录水平的影响 |
| 3.5 SXF对LEP干预的垂体细胞中GnRHR和雌激素受体蛋白表达水平的影响 |
| 3.6 SXF对LEP干预的垂体细胞中PKC-MAPK通路中关键蛋白表达水平的影响 |
| 3.7 HY-N2180可部分逆转SXF对垂体细胞PKC-MAPK通路的抑制作用 |
| 3.8 SXF通过抑制PKC-MAPK通路缓解LEP干预的垂体细胞分泌FSH、LH |
| 第五部分 讨论和结语 |
| 1 讨论 |
| 1.1 从垂体GnRH受体信号转导及雌激素反馈机制研究疏肝泻火方的作用机制 |
| 1.2 动物实验部分讨论 |
| 1.3 细胞实验部分讨论 |
| 2 结论 |
| 3 特色与创新 |
| 4 不足与展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 1 主要符号及缩略语表 |
| 2 RT-qPCR的扩增曲线和溶解曲线 |
| 攻读博士学位期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（2）滋阴清肝方对雌性中枢性性早熟大鼠褪黑素及受体的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 中、英文缩略词表 |
| 前言 |
| 第一部分 理论研究 |
| 1.西医学对性早熟的研究 |
| 1.1 中枢性性早熟的发病机制 |
| 1.2 中枢性性早熟的治疗进展 |
| 2.中医学对性早熟的研究 |
| 2.1 古代中医对性早熟的认识 |
| 2.2 性早熟的中医病因病机及辨证论治 |
| 2.3 中医药防治性早熟的作用机理 |
| 第二部分 动物实验研究 |
| 1.实验材料 |
| 1.1 实验药物 |
| 1.2 实验动物 |
| 1.3 实验试剂 |
| 1.4 实验仪器 |
| 2.实验方法 |
| 2.1 动物分组与雌性CPP大鼠模型的建立 |
| 2.2 各组大鼠阴门开启日龄及第1个发情间期 |
| 2.3 各组大鼠子宫和卵巢系数，子宫、卵巢组织形态，卵巢黄体数，子宫壁厚度 |
| 2.4 各组大鼠夜间血清MT、LH、BGP水平 |
| 2.5 各组大鼠下丘脑GnRH、MT1、MT2mRNA的表达水平 |
| 2.6 各组大鼠体质量的变化 |
| 2.7 统计学处理 |
| 3. 实验结果 |
| 3.1 一般情况观察 |
| 3.2 各组大鼠阴门开启情况及出现第1个发情间期的情况 |
| 3.3 各组大鼠子宫和卵巢发育的情况 |
| 3.4 各组大鼠血清MT、LH及BGP水平 |
| 3.5 各组大鼠下丘脑GnRH、MT1、MT2 mRNA表达水平 |
| 3.6 各组大鼠体质量的变化 |
| 4.讨论 |
| 4.1 雌性CPP动物模型的建立 |
| 4.2 阳性对照药物的选择 |
| 4.3 滋阴清肝方对阴门开启及出现第1个发情间期的影响 |
| 4.4 滋阴清肝方对子宫、卵巢系数的影响 |
| 4.5 滋阴清肝方对子宫壁厚度的影响 |
| 4.6 滋阴清肝方对卵巢黄体生成数的影响 |
| 4.7 滋阴清肝方对LH的影响 |
| 4.8 滋阴清肝方对BGP的影响 |
| 4.9 滋阴清肝方对下丘脑GnRH mRNA影响 |
| 4.10 滋阴清肝方对血清MT和下丘脑MT1、MT2 mRNA的影响 |
| 4.11 滋阴清肝方对体质量的影响 |
| 5. 结论 |
| 第三部分 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 附录一 综述 |
| 参考文献 |
| 附录二 研究生在学期间发表论文、科研情况 |
| 致谢 |
（3）雌性性早熟大鼠下丘脑GABAA受体α亚基的表达及滋阴泻火中药合剂对其表达的影响（论文提纲范文）
| 目录 |
| 英语缩写词表 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 1. 实验动物 |
| 2. 主要试剂 |
| 3. 主要仪器 |
| 4. 实验动物模型 |
| 5. 放射免疫法检测雎性大鼠血清E2, LH和FSH的激素水平 |
| 6. RT-PCR法观察雌性性早熟大鼠下丘脑GABA_A受体α1-3亚基和ERα mRNA的表达 |
| 7. realtime PCR法观察雌性性早熟大鼠下丘脑GnRH,GABA_A受体α亚基和GADmRNA的表达 |
| 8. Western Blot法观察滋阴泻火中药对雌性性早熟大鼠下丘脑GABAA受体α1和α3亚基蛋白表达的影响 |
| 9. 数据处理方法 |
| 结果 |
| 1. 雌性性早熟大鼠模型及下丘脑及GABAA受体α1-3亚基mRNA的表达 |
| 1.1. 雌性性早熟大鼠阴门开启情况和子宫卵巢器官系数 |
| 1.2. 雌性性早熟大鼠下丘脑GABA_A受体α1-3亚基mRNA的表达 |
| 2. 滋阴泻火中药对雌性性早熟大鼠青春期发育及下丘脑GnRH、GAD mRNA以及GABA_A受体α亚基表达的影响 |
| 2.1. 滋阴泻火中药对雌性性早熟大鼠血清E2,LH和FSH水平的影响 |
| 2.2. 滋阴泻火中药对性早熟大鼠子宫和卵巢器官系数的影响 |
| 2.3. 滋阴泻火中药对性早熟大鼠下丘脑GnRH mRNA表达的影响 |
| 2.4. 滋阴泻火中药对下丘脑GABAA受体α亚基mRNA及蛋白表达的影响 |
| 2.5. 滋阴泻火中药对性早熟大鼠下丘脑ERαmRNA表达的影响 |
| 2.6. 滋阴泻火中药对性早熟大鼠下丘脑GAD65和GAD67mRNA表达的影响 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录1 个人简历 |
| 附录2 致谢 |
| 附录3 主要溶液及配制 |
| 综述：GABA及受体GABA_A在雌性哺乳动物青春期启动中的作用 |
| 参考文献 |
（4）化痰泻火养阴法治疗女童特发性性早熟的临床研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词 |
| 前言 |
| 第一部分 性早熟的研究概况 |
| 一 现代医学研究 |
| 二 传统医学认识 |
| 三 存在问题 |
| 第二部分 研究思路 |
| 一 立项依据 |
| 二 拟解决的关键问题 |
| 三 技术路线 |
| 第三部分 临床研究 |
| 一 临床资料 |
| 1 病例选择标准 |
| 2 观察对象 |
| 二 研究方法 |
| 1 治疗方法 |
| 2 观察项目 |
| 3 疗效标准 |
| 4 统计方法 |
| 三 结果与结论 |
| 1 结果 |
| 2 结论 |
| 第四部分 讨论 |
| 一 病理因素 |
| 1 痰浊 |
| 2 郁热 |
| 3 阴伤 |
| 二 病机过程 |
| 三 治疗原则与治法 |
| 1 治疗原则 |
| 2 具体治法 |
| 四 组方选药 |
| 1 药物功效 |
| 2 组方意义 |
| 五 可能存在的作用机制 |
| 六 抗早颗粒的临床经济学意义 |
| 1 疗效 |
| 2 起效时间 |
| 3 费用─效果关系 |
| 第五部分 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
（5）雌性性早熟大鼠脑内Kiss-1/GPR54的表达及滋阴泻火中药合剂对其表达的影响（论文提纲范文）
| 英文缩写词表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 第一部分 雌性性早熟大鼠脑内Kiss-1/GPR54在青春期发育进程中的时相和空间表达规律 |
| 1.材料 |
| 2.方法 |
| 3.结果 |
| 4.讨论 |
| 5.结论 |
| 6.参考文献 |
| 第二部分 Kisspeptin/GPR54参与性早熟大鼠青春期提前启动的机制研究 |
| 1.材料 |
| 2.方法 |
| 3.结果 |
| 4.讨论 |
| 5.结论 |
| 6.参考文献 |
| 第三部分 滋阴泻火中药合剂对性早熟大鼠下丘脑Kiss-1/GPR54表达的影响 |
| 1.材料 |
| 2.方法 |
| 3.结果 |
| 4.讨论 |
| 5.结论 |
| 6.参考文献 |
| 总结 |
| 附录 |
| 1.发表论文和参加会议目录,论文自评 |
| 2.致谢 |
| 3.主要溶液及配制 |
| 综述 |
（6）儿科Ⅱ号合剂对真性性早熟大鼠骨生长影响的实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 文献综述 |
| 1、性早熟的定义及分类 |
| 2、 正常青春期的启动与性早熟的发病机制 |
| 3、 青春期体格发育及促生长轴与性腺轴在围青春期的相互作用 |
| 4、 BGP 与儿童生长发育 |
| 5、 ICPP 的西医治疗 |
| 6、ICPP 中医治疗概况 |
| 第一章 材料与方法 |
| 1 研究对象 |
| 2 主要试剂 |
| 3 主要仪器 |
| 4 实验方法 |
| 5 数据处理与统计学分析 |
| 第二章 结果 |
| 1. 大鼠阴道口开放的时间(VO) |
| 2. 大鼠第一个发情间期出现的时间(D1) |
| 3. 阴道细胞涂片(vaginal smear) |
| 4. 卵巢指数(index of overy) |
| 5. 子宫指数(index of uterus) |
| 6. 卵巢黄体出现率(incidence of corpora lutea) |
| 7. 总 RNA 纯度测定 |
| 8. 检测 RNA 完整性 |
| 9. 骨骺生长板 mRNA 半定量逆转录扩增 |
| 10. 下丘脑 GnRHmRNA 半定量逆转录扩增 |
| 11. 放射免疫法测定血 LH 水平 |
| 12. 放射免疫法测定血 BGP 水平 |
| 第三章 讨论 |
| 1、 雌性大鼠真性性早熟模型的建立 |
| 2、 儿科Ⅱ号合剂对性早熟大鼠骨生长的影响 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
（8）儿科Ⅱ号合剂干预大鼠真性性早熟发生的实验研究（论文提纲范文）
| 摘 要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词 |
| 前 言 |
| 文献综述 |
| 第一章 材料与方法 |
| 1 研究对象 |
| 2 主要试剂 |
| 3 主要仪器 |
| 4 实验方法 |
| 4.1 动物实验 |
| 4.2 性腺和性器官的检查 |
| 4.3 下丘脑总RNA的提取及GnRHmRNA半定量逆转录扩增 |
| 4.4 放射免疫法测定血LH水平: |
| 5 数据处理与统计学分析 |
| 第二章 结 果 |
| 1 大鼠阴道口开放的时间(VO) |
| 2 大鼠第一个发情间期出现的时间(D |
| 3 阴道细胞涂片(vaginal smear) |
| 4 卵巢指数(index of overy) |
| 5 子宫指数(index of uterus) |
| 6 卵巢黄体出现率(incidence of corpora lutea) |
| 7 子宫壁厚度(depth of uterus) |
| 8 总RNA纯度测定 |
| 9 检测RNA完整性 |
| 10 下丘脑GnRHmRNA半定量逆转录扩增 |
| 11 放射免疫法测定血LH水平 |
| 第三章 讨 论 |
| 1 性早熟模型的建立和评价 |
| 1.1 青春期发动机制 |
| 1.2 性早熟模型的建立 |
| 1.3 性早熟模型的评价 |
| 2 祖国医学对特发性真性性早熟的认识 |
| 2.1 特发性真性性早熟的中医病理机制 |
| 2.2 儿科II号合剂的组成及功效 |
| 2.3 儿科II号合剂对特发性真性性早熟的干预机理 |
| 3 儿科Ⅱ号合剂与甲地孕酮的对照研究 |
| 3.1 甲地孕酮的选择 |
| 3.2 儿科II号合剂与甲地孕酮的对照研究 |
| 4 问题与展望 |
| 结 论 |
| 致 谢 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
（9）性早熟差异表达基因的克隆和鉴定及滋阴泻火中药合剂对差异基因的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 动物 |
| 2.1.2 试剂 |
| 2.1.3 仪器 |
| 2.2 方法 |
| 2.3 统计方法 |
| 2.4 溶液配制 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 达那唑诱导的大鼠性早熟模型的建立和评估 |
| 3.2 性早熟大鼠下丘脑差异基因指纹图的建立和差异表达基因的鉴定 |
| 3.3 滋阴泻火中药合剂对差异基因表达的影响 |
| 3.4 GnRHmRNA在外周血单个核细胞中的表达 |
| 3.5 KIAA1538mRNA在外周血单个核细胞中的表达 |
| 4 讨论 |
| 4.1 达那唑诱导的大鼠性早熟模型的建立和评估 |
| 4.2 用RAP-PCR方法分离差异表达基因 |
| 4.3 性早熟时已知基因GnRH表达的变化 |
| 4.4 达那唑诱导的性早熟大鼠下丘脑基因IPP-1表达的变化 |
| 4.5 滋阴泻火中药合剂对差异基因表达的影响 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 附录1 |
| 附录2 |
| 致谢 |
| 综述 |
四、滋阴降火中药合剂治疗真性儿童性早熟作用的神经生物学机制的研究（论文参考文献）
- [1]基于“肝肾同源”辨治女童性早熟经验总结及疏肝泻火方治疗CPP的机制研究[D]. 尹蔚萍. 南京中医药大学, 2021(01)
- [2]滋阴清肝方对雌性中枢性性早熟大鼠褪黑素及受体的影响[D]. 王蔚华. 湖北中医药大学, 2016(08)
- [3]雌性性早熟大鼠下丘脑GABAA受体α亚基的表达及滋阴泻火中药合剂对其表达的影响[D]. 李婧. 复旦大学, 2012(03)
- [4]化痰泻火养阴法治疗女童特发性性早熟的临床研究[D]. 郝海燕. 南京中医药大学, 2008(S1)
- [5]雌性性早熟大鼠脑内Kiss-1/GPR54的表达及滋阴泻火中药合剂对其表达的影响[D]. 孙妍. 复旦大学, 2007(05)
- [6]儿科Ⅱ号合剂对真性性早熟大鼠骨生长影响的实验研究[D]. 曹守凤. 东南大学, 2005(01)
- [7]补肾中药调整性早熟儿童青春发育进程的作用及其机理研究[A]. 蔡德培. 全国中西医结合生殖健康学术研讨会论文及摘要集, 2004
- [8]儿科Ⅱ号合剂干预大鼠真性性早熟发生的实验研究[D]. 刘艳. 东南大学, 2004(02)
- [9]性早熟差异表达基因的克隆和鉴定及滋阴泻火中药合剂对差异基因的影响[D]. 田占庄. 复旦大学, 2003(02)
- [10]滋阴降火中药合剂治疗真性儿童性早熟作用的神经生物学机制的研究[J]. 陈伯英,庄振杰,蔡德培. 中国中西医结合杂志, 2002(S1)